集美們，集帥們，小源課堂開課啦~

微波爐，有吧？錐形瓶、電子天平，有吧？小小瓊脂糖凝膠，拿捏！

接下來，小源將在配制步驟、注意事項(xiàng)以及小技巧等幾個方面來闡述：

一、配制步驟

1、安裝制膠器

將制膠底板放在水平工作臺上，安裝制膠底板，插上樣品梳；

2、凝膠濃度的選擇

根據(jù)需電泳的DNA樣品分子大小，參考下表：

3、瓊脂糖凝膠制備

根據(jù)所需的凝膠濃度，稱取對應(yīng)重量的瓊脂糖粉加入錐形瓶中，并加入相應(yīng)體積的1x TAE或1X TBE緩沖液，在微波爐中加熱至瓊脂糖粉末完全溶解即可（以1%的濃度為例，1g瓊脂糖粉末應(yīng)加入到100ml的1X緩沖溶液中）；

4、灌膠

待步驟3的瓊脂糖溶液冷卻，溫度45~60℃時，將其倒入燒杯中并加入核酸染料混勻后，倒入已安裝好的制膠器中（核酸染料的用量請根據(jù)使用說明加入），待凝膠完全冷卻凝固后即可使用。

二、注意事項(xiàng)

1、安裝制膠器時，制膠底板要與制膠器緊貼，防止灌膠時瓊脂糖溶液流入制膠底板與制膠器的縫隙中；另外樣品梳安裝時，要確保兩端都完全卡入制膠器的卡槽，避免樣品孔深淺不一；

2、在瓊脂糖溶液加熱時過程中，要防止溶液沸騰過度；操作時請戴上放熱手套；

3、灌膠操作過程中，盡量將瓊脂糖溶液輕輕倒入制膠器中，避免產(chǎn)生大量氣泡；灌膠完成后，檢查是否有氣泡在樣品梳孔附近；

4、凝膠冷卻凝固需要30min~1h左右的時間，完全凝固前，不要隨意挪動制膠器或拔走樣品梳；

二、瓊脂凝膠配置小技巧

1、瓊脂糖試劑用完后，瓶蓋不要丟，留著有大用：

可將其蓋在錐形瓶上，在瓊脂糖溶液加熱過程中，可減少因沸騰而蒸發(fā)的緩沖溶液體積；

2、緩沖溶液不吝嗇：

由于加熱過程中，會蒸發(fā)一定體積的緩沖溶液，所以在制備時，可適當(dāng)多加入5%~10%體積的緩沖溶液，避免蒸發(fā)后瓊脂糖溶液體積減少，導(dǎo)致最終凝膠厚度不滿足于實(shí)驗(yàn)；

3、想要制膠快，就要多動手：

在加熱過程中，可以多次暫停微波爐，拿出錐形瓶小心搖動，使瓊脂糖粉末與緩沖溶液充分接觸，加快溶解；

以上就是配置瓊脂凝膠的相關(guān)步驟與注意事項(xiàng)啦！還有什么疑問，歡迎提出在評論區(qū)和小源交流噢！