色譜是一種分析技術(shù)，其原理是通過兩相（固定相和流動相）分離樣品中的組分。最初的色譜為柱色譜，但其應(yīng)用和效率都非常有限。為了克服這一局限性，色譜結(jié)合了分離和檢測樣品成分的先進技術(shù)，多種色譜技術(shù)得以發(fā)展。
在本文中，小編將介紹幾種色譜技術(shù)及它們各自的特點，希望能幫到大家。
柱色譜是使用最廣泛的色譜法，通常用于實驗室和工業(yè)研究。柱色譜操作簡單，技術(shù)成本較低。如下圖所示，有一根長長的柱子，借助一個架子懸在空中。將固定相填充進柱中，流動相從色譜柱頂部倒入，流經(jīng)色譜柱中固定相上的樣品，從而實現(xiàn)分離。
高效液相色譜，又稱為“近代柱色譜”，是色譜法的一個重要分支。其所使用的固定相由小顆粒組成，以增加表面積，提高分離速率，因此它被稱為高效液相色譜。其原理與柱色譜相似。流動相攜帶混合物的組分以不同的速度通過色譜柱，其通過的速率取決于組分對流動相和固定相的相對親和力。通過不同的檢測器檢測樣品中的各組分，如紫外可見光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器或示差折光檢測器等。大分子（如蛋白質(zhì)、脂肪）、小分子（如單胺類）以及化學(xué)成分相似的物質(zhì)（如單胺類、類固醇）都可以用高效液相色譜分析。高效液相色譜，應(yīng)用范圍廣，應(yīng)用于法醫(yī)、藥物、食品、臨床、環(huán)境和生物技術(shù)等領(lǐng)域。
在氣相色譜中，以氣體作流動相，以固定液或固體吸附劑作固定相。根據(jù)混合物與流動相、固定相之間的相對親和力，分離混合物的揮發(fā)性成分。由于固定相的數(shù)量有限以及儀器和操作程序相對昂貴，這種技術(shù)沒有得到廣泛的應(yīng)用。但氣相色譜對熱穩(wěn)定、易揮發(fā)、能氣化的物質(zhì)具有較好的檢測效果。
4.紙層析
紙層析，又稱紙色譜，以一種特殊設(shè)計的濾紙作為固定相。濾紙中的纖維素層含有的水分作為固定相。緩沖液和其他溶劑用作流動相。分離的原理是相似相溶。紙色譜法可以分析的樣品非常廣。用毛細(xì)管或微量吸管將流動相中溶解的樣品標(biāo)記在濾紙上，然后將濾紙放入容器中，使其浸入溶劑中，于陰暗處進行層析，樣品將在濾紙表面分離，然后對其形成的顏色進行識別。紙色譜可以分析碳水化合物、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、藥物、糖苷、生物堿、血液和尿液等樣品中的代謝物。
5.薄層色譜（TLC）
薄層色譜，又稱為薄層層析，以合適的溶劑作為流動相，以涂布在支持板上的支持物作為固定相。分離的原理是吸附。一個或多個樣品涂在有薄層板上。如下圖所示，該板部分浸入展開劑中，溶劑沿著吸附劑移動。樣品組分隨展開劑以不同的速率移動，這取決于它們對吸附劑的親和力，從而實現(xiàn)組分分離。薄層色譜與紙色譜類似，可用于分析任何類型的樣品，但通常用于分析植物提取物、藥物、碳水化合物、蛋白質(zhì)、抗生素、維生素等。
6. 離子交換色譜
離子交換色譜，用離子交換樹脂作為固定相，主要用來分離帶電離子的混合物。流動相中的組分離子與離子交換樹脂（固定相）上的離子基團進行可逆交換，這種可交換的離子是陰離子或陽離子。如下式所示，
流動相中帶電荷的離子與固定相（離子交換樹脂）中帶電荷的離子發(fā)生離子互換。
流動相中帶相反電荷的離子先從柱中洗脫出來，然后再用緩沖溶液將那些與離子交換樹脂結(jié)合的分子洗脫出來。
本文由迪信泰檢測平臺（Biotech-Pack-Analytical）整理編輯。
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參考資料：10 Types of Chromatography | Based on Different Techniques & Methods.
