1、定位細(xì)胞核:DAPI
DAPI,是一種能與DNA結(jié)合的熒光染料,細(xì)胞標(biāo)記效率高。常用于死細(xì)胞細(xì)胞核標(biāo)記。
常用激發(fā)波長(zhǎng)405 nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)454 nm,呈現(xiàn)藍(lán)光。
DAPI未結(jié)合DNA時(shí)最大吸收波長(zhǎng)340 nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)488 nm。DAPI與DNA結(jié)合后,最大吸收波長(zhǎng)為358 nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm,呈現(xiàn)藍(lán)光。
2、光敏劑TCPP,Tetrakis (4-carboxyphenyl) porphyrin?(四(4-羧基苯基)卟吩; TCPP)

(1)TCPP卟啉有熒光。許多卟啉和金屬卟啉在室溫,溶液狀態(tài)下既能發(fā)射熒光,又能發(fā)射磷光。卟啉可作為熒光探針。實(shí)驗(yàn)中可用直接掃描600-800 nm熒光值,也可根據(jù)材料情況給與激發(fā)光后收集特定的熒光。
卟啉的發(fā)射波長(zhǎng)大約在645-680 nm之間,這個(gè)波長(zhǎng)范圍在紅光和近紅外線的范圍之內(nèi)。當(dāng)分子從激發(fā)態(tài)退回到基態(tài)時(shí),會(huì)釋放能量,產(chǎn)生發(fā)光。
TCPP在紫外-可見(jiàn)光區(qū)有較強(qiáng)的吸收峰,吸收峰波長(zhǎng)為414 nm,屬于Soret帶。同時(shí),TCPP在280 nm處有一個(gè)明顯的吸收峰,這是其Q帶吸收峰。
(2)卟啉自聚集,實(shí)驗(yàn)中需注意檢測(cè)其在PBS、培基和保存溶劑中的粒子直徑分布。
3、Cy3
Cy3耦聯(lián)基團(tuán)激發(fā)光最大波長(zhǎng)550 nm,最強(qiáng)發(fā)射光為570 nm。呈現(xiàn)紅光。
可使用TRITC樣濾波片。Cy3在氬光燈(514 nm或528 nm)下可被激發(fā)50%光強(qiáng),在氦氖燈(543 nm)或汞燈(546 nm)下約75%。