
結(jié)直腸癌是世界范圍內(nèi)腫瘤患者的第三大死因,它是一種自發(fā)性、慢性結(jié)腸黏膜炎癥病變,其發(fā)病機制目前尚未清楚。但研究發(fā)現(xiàn),人類最常見的兩種慢性炎癥性腸道疾病(IBD)是潰瘍性結(jié)腸炎 (ulcerative colitis,UC)和 Chron’s疾病(CD),它們均與結(jié)直腸癌發(fā)生相關(guān)。自從日本學者于1985年首次應用硫酸葡聚糖(DSS)制備了鼠UC模型后,大量的動物模型被應用于UC的研究,而DSS結(jié)腸炎模型是目前應用最為廣泛的UC模型之一。
UC建模概述
現(xiàn)行研究中最常用的UC建模類型大約分為:自發(fā)模型、誘導模型(化學藥物誘導:TNBS三硝基苯磺酸,DSS葡聚糖硫酸鈉等、免疫學方法誘導、細胞移植誘導)以及基因修飾模型等。
葡聚糖硫酸鈉鹽(Dextran Sulfate Sodium Salt, DSS)是一種聚陰離子衍生物,其誘導結(jié)腸炎模型的機制雖仍未十分明確, 但通常認為與巨噬細胞功能失調(diào)、腸道菌群失調(diào)、DSS對結(jié)腸上皮的毒性作用、細胞因子在DSS結(jié)腸炎模型的發(fā)病中起重要作用(腫瘤壞死因子、白介素、干擾素、IL-10和IL-12)等機制有關(guān)。
對比多種UC建模類型,DSS造模具有很大的優(yōu)勢,可以說是目前腸炎造模研究領(lǐng)域金標準。
DSS造模的優(yōu)勢大約可以總結(jié)為以下幾點:
·癥狀、體征以及病理特征等完全與人類UC基本一致;
·周期可長可短,能夠模擬急性腸炎,慢性腸炎以及腸炎修復模型;
·方法簡單,可重復性,維持性好;
·可作為研究人類UC的致炎機制及抗炎藥物模型,也可以作為免疫機制及遺傳學研究的模型。
MP Biomedicals生產(chǎn)的DSS具有高質(zhì)量、高純度、高重復性的特點。迄今為止,有超過8000篇科學文獻引用,有效性得到了業(yè)界廣泛認可。

給小鼠正常喂食并用2%的DSS代替飲用水,持續(xù)一周,然后處死。每天監(jiān)測每只小鼠的體重。數(shù)據(jù)表示方法為SD標準差(數(shù)據(jù)來源于Bamba S. et al., (2012). Dig Dis Sci, 57(2): 327-34)。
產(chǎn)品名稱:葡聚糖硫酸鈉(DSS)
貨號:0216011010 包裝:10g
貨號:0216011050 包裝:50g
貨號:0216011080 包裝:100g
貨號:0216011090 包裝:500g
MP產(chǎn)品優(yōu)勢:
·提供最高的硫含量(18-20%),<0.2%的游離硫酸鈉(影響造模成功的決定因素);
·最高手性;
·最高純度(99%)和穩(wěn)定性;
·行內(nèi)性價比最高的造模產(chǎn)品;
·超過8000篇文獻引用。
DSS建模實驗步驟
小鼠急性\慢性結(jié)腸炎模型示意:

葡聚糖硫酸鈉致小鼠結(jié)腸炎模型的建立與評價:

DSS腸炎造模的觀察指標和方法:
1.疾病活動指數(shù)(DAI)的評估:包括體重,大便性狀和血便;
DAI評分標準:
*正常大便:成型大便;松散大便;不黏附于肛門的糊狀、半成形大便;稀便:可黏附于肛門的稀水樣便。

2.組織學損傷指數(shù)(HI)的評估:觀察結(jié)腸內(nèi)有無出血,潰瘍等。取一小塊組織常規(guī)石蠟包埋、切片、HE染色,觀察組織學改變并進行評分;
3.病理切片,HE染色觀察。
DSS腸炎模型應用
MP的DSS具有高質(zhì)量、高純度、可重復性的特點??捎糜跐冃越Y(jié)腸炎病因、發(fā)病機制的研究,炎癥反應中免疫學研究,潰瘍性結(jié)腸炎治療,抗炎藥物的研發(fā)、炎癥相關(guān)性的癌癥形成機制的研究等??捎行в糜谂R床、分子生物學、生物醫(yī)學甚至是化妝品行業(yè)。
AOM聯(lián)合DSS高效誘導結(jié)直腸腫瘤應用

偶氮甲烷(Azoxymethane, AOM )
一種甲基化劑,可以在DNA中形成6-O-甲基鳥嘌呤,導致堿基錯配,從而誘導組織中的腫瘤形成。
產(chǎn)品名稱?偶氮甲烷AOM
貨號?02180139.1
包裝?10g
AOM/DSS 模型
AOM常與致炎劑DSS協(xié)同作用,可誘導炎癥性腸病(IBD)逐步發(fā)展為炎癥相關(guān)的結(jié)直腸腫瘤。AOM/DSS模型能夠很好地模擬慢性腸道炎癥誘發(fā)腫瘤的病理過程,被廣泛用于炎癥相關(guān)性腫瘤形成機制的研究。
AOM+DSS誘導的結(jié)腸腫瘤模型病理HE染色

AOM/DSS造模優(yōu)勢:
·方法簡單;
·重復性高;
·7-10周即可建立腫瘤模型;
·可用于任何遺傳背景的動物(敲除、轉(zhuǎn)基因等)。
無PCR基因簡單快速提取應用
MP出品FastDNA TM Spin糞便試劑盒是基于DSS在基因提取應用上的重要突破。FastDNA TM Spin糞便試劑盒可從新鮮或冷凍的人或動物的糞便樣本中純化基因組DNA,無需使用其他有機溶劑。該試劑盒包含裂解介質(zhì)E,與Fastprep-24 5G配合使用可在40秒內(nèi)裂解樣本。使得樣本中的基因組DNA、少量的RNA、腐殖酸或多酚等污染物充分釋放到溶液中,離心后,基因組DNA被結(jié)合到Geneclean?專利的硅膠基質(zhì)上,然后再用洗脫液將DNA洗脫下來,去除RNA、PCR抑制劑及有機污染物。得到的DNA可直接用于PCR、Real-Time PCR、傳染病研究和篩查等下游實驗。方便的離心柱純化過程使得實驗操作更加簡單、便捷。

其與FastPrep-24 TM 5G快速樣品制備儀配合使用,糞便樣本能夠在短短幾十秒內(nèi)破碎。

利用FastDNA TM Spin糞便試劑盒,從糞便樣本中提取得到的基因組DNA的凝膠電泳結(jié)果。1.2%的凝膠(0.5X TE)。 ①DNA Marker ②牛糞便,200ng DNA ③馬糞便,200ng DNA ④貓糞便,200ng DNA ⑤鳥糞便,200ng DNA
參考文獻:
1. Q. Jia, I.Ivanov, Z.Zlatev, et al., Dietary _sh oil and curcumin combine to modulate colonic cytokinetics and gene expression in dextran sulfate sodium treated mice, Br.J.Nutr., 2011;106(4),519-9.
2. R.Arsenescu, V.Arsenescu, J.Zhong et al, Role of xenobiotic receptor in in_ammatorybowel disease, In_amm.Bowel Dis.,2011;17(5), 1149-2.
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