2020-11-11 農(nóng)桿菌EHA105

GV3101菌株為C58型背景,核基因中含有篩選標(biāo)簽——利福平抗性基因rif,為了便于轉(zhuǎn)化操作,此菌株攜帶一無(wú)自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的胭脂堿型Ti質(zhì)粒pMP90 (pTiC58DT-DNA),此質(zhì)粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件,pMP90 (pTiC58DT-DNA)質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能被破壞,但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體T-DNA順利轉(zhuǎn)移)。pMP90 (pTiC58DT-DNA)型Ti質(zhì)粒含有篩選標(biāo)簽:Strep和gent,賦予GV3101菌株鏈霉素和慶大霉素抗性,適用于擬南芥、煙草、玉米、土豆等植物的轉(zhuǎn)基因操作,經(jīng)pCAMBIA2301質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)104cfu/μg。

EHA105菌株由EHA105菌株改造而來(lái),為C58型背景,核基因中含有篩選標(biāo)簽——利福平抗性基因rif,為了便于轉(zhuǎn)化操作,此菌株攜帶一無(wú)自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的琥珀堿型Ti質(zhì)粒pEHA105 (pTiBo542DT-DNA),此質(zhì)粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件,pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能被破壞,但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體T-DNA順利轉(zhuǎn)移)。pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)型Ti質(zhì)粒含有篩選標(biāo)簽:strep,賦予EHA105菌株鏈霉素抗性,適用于水稻、煙草等植物的轉(zhuǎn)基因操作,經(jīng)pCAMBIA2301質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)104cfu/μg。

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