回顧一下最近兩天去實驗室所學習到的東西，昨天看了有關(guān)轉(zhuǎn)染方面的操作，首先，

1.準備轉(zhuǎn)染所需材料：lip2000? 小干擾? ?optiMEM培養(yǎng)基（無血清的培養(yǎng)基）RNA-free槍尖? 無酶EP管（按照所需準備足夠數(shù)量）

2.給準備好的無酶EP管內(nèi)加入500ul（由于轉(zhuǎn)染后放置于小皿中）optiMEM培養(yǎng)基，然后一半的無酶EP管中加入10ul的lip2000,剩余一半中一個設(shè)為空白對照，其余的都各加小干擾10ul，放置五分鐘。其目的在于？之后將含有l(wèi)ip2000的液體加入放有小干擾的管中，充分混勻放置20min。

3.放置4~5小時后補液，補2ml無雙抗的培養(yǎng)基。

今天看了病毒轉(zhuǎn)染，回顧一下步驟：（在病毒轉(zhuǎn)染操作的過程中需要關(guān)掉風機、空調(diào)等設(shè)備，所以一般在進行相關(guān)操作時盡量選擇在無人時操作，以免為他人帶來麻煩）

1.準備病毒轉(zhuǎn)染所需材料：病毒原液? 基培? ?polybleme(增強劑）無酶EP管（按照所需準備足夠數(shù)量）

2.給準備好的無酶EP管內(nèi)加入1ml基培（目的是無血清以便于病毒更好的轉(zhuǎn)染），之后加入?polybleme(增強劑），（針對要加入的量根據(jù)已有的規(guī)格需要進行計算，如果是1mg/ml,則需要稀釋為5ug/ml），再加入計算好體積的病毒原液（計算公式依據(jù)說明書上的來計算）。做好標記。

3.將其放置于孵箱內(nèi)4個小時，之后補液，補1ml無雙抗的培養(yǎng)基？切記：24小時內(nèi)需要完成換液，換液時可以運用完培，72小時后顯微鏡下觀察是否病毒轉(zhuǎn)染成功，如若不行，則此次實驗失敗。