CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）是生命進(jìn)化歷史上，細(xì)菌和病毒進(jìn)行斗爭產(chǎn)生的免疫武器，簡單說就是病毒能把自己的基因整合到細(xì)菌，利用細(xì)菌的細(xì)胞工具為自己的基因復(fù)制服務(wù)，細(xì)菌為了將病毒的外來入侵基因清除，進(jìn)化出CRISPR系統(tǒng)，利用這個(gè)系統(tǒng)，細(xì)菌可以不動(dòng)聲色地把病毒基因從自己的染色體上切除，這是細(xì)菌特有的免疫系統(tǒng)。微生物學(xué)家10年前就掌握了細(xì)菌擁有多種切除外來病毒基因的免疫功能，其中比較典型的模式是依靠一個(gè)復(fù)合物，該復(fù)合物能在一段RNA指導(dǎo)下，定向?qū)ふ夷繕?biāo)DNA序列，然后將該序列進(jìn)行切除。許多細(xì)菌免疫復(fù)合物都相對(duì)復(fù)雜，其中科學(xué)家掌握了對(duì)一種蛋白Cas9的操作技術(shù)，并先后對(duì)多種目標(biāo)細(xì)胞DNA進(jìn)行切除。這種技術(shù)被稱為CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)，迅速成為生命科學(xué)最熱門的技術(shù)。
海星生物技術(shù)團(tuán)隊(duì)自主研發(fā)的基因編輯系統(tǒng)——ClonePlus?技術(shù)和VIRUS-Free?技術(shù)，為您的課題保駕護(hù)航。
ClonePlus?技術(shù)
ClonePlus?技術(shù)：是Cas9X技術(shù)平臺(tái)研發(fā)的專有高效細(xì)胞敲除的新技術(shù)，主要通過高通量電轉(zhuǎn)系統(tǒng)和高通量的克隆分選技術(shù)結(jié)合，獲得基因編輯的單細(xì)胞，其克隆形成率可以達(dá)98%，就算是克隆形成率低的細(xì)胞株也能獲得敲除單克隆，針對(duì)懸浮細(xì)胞也有更高的單克隆形成率。
輕松幫您實(shí)現(xiàn)細(xì)胞系（Cell Line）、永生化細(xì)胞（Immortalized Cell）、干細(xì)胞（Stem Cell）的基因編輯，無論是懸浮細(xì)胞（THP-1、K562、U937、Jurkat等）還是貼壁細(xì)胞（Hela、HEK293、HepG2等）或是易分化的細(xì)胞（MSCs、NSC、ES、BV2等）。
VIRUS-Free? 技術(shù)
VIRUS-Free??是一種利用轉(zhuǎn)座子進(jìn)行細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建和篩選的技術(shù)，以替代慢病毒感染構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的技術(shù)。其載體中包括了轉(zhuǎn)座子的識(shí)別區(qū)域，能將目的片段從載體上或者BAC分子上切割下來形成一個(gè)小環(huán)結(jié)構(gòu)，并在基因組里面的固定序列位置進(jìn)行插入，從而實(shí)現(xiàn)穩(wěn)轉(zhuǎn)。
目前已經(jīng)在CAR-T細(xì)胞治療中得到較多的臨床應(yīng)用，并充分體現(xiàn)出其：低成本、高效率、基因表達(dá)穩(wěn)定的特點(diǎn)。
海星生物通過不斷探索，開發(fā)的VIRUS-Free技術(shù)通過構(gòu)建轉(zhuǎn)座系統(tǒng)質(zhì)粒，將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞，在轉(zhuǎn)座酶的作用下，高拷貝的Cas9蛋白與sgRNA表達(dá)元件被整合到基因組上，比傳統(tǒng)的病毒法節(jié)省了3-4周，價(jià)格節(jié)省了約40%。
部分成功案例
案例1：THP-1細(xì)胞基因敲除(KO）
敲除基因：A基因；敲除區(qū)域：Exon 1~13；
敲除片段大?。簙30 Kb
?案例2：SiHa細(xì)胞基因敲除（KO）
敲除基因：C基因；敲除區(qū)域：Exon 4；
敲除片段大?。?.4 Kb
