轉(zhuǎn)錄組學(xué)習(xí)筆記

1.轉(zhuǎn)錄組(transcriptome)概念:廣義的轉(zhuǎn)錄組指特定發(fā)育階段或生理?xiàng)l件下從一種細(xì)胞或組織的基因組所轉(zhuǎn)錄出的RNA的總和,包括編碼蛋白質(zhì)的mRNA和各種非編碼RNA(ncRNA),如rRNA、tRNA、核仁小RNA(snoRNA)、小核RNA(snRNA)、微RNA(mRNA)和其他ncRNA等。

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)主要目標(biāo):? catalogue all species of transcript, including mRNAs, non-coding RNAs and small RNAs

3.轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(RNA-seq):利用高通量測(cè)序技術(shù)將細(xì)胞或組織中全部或部分mRNA、small RNA和no-codingRNA 進(jìn)行測(cè)序分析的技術(shù)。

RNA-Seq 原理圖?

原理:長(zhǎng)RNA首先通過RNA片斷或DNA片斷轉(zhuǎn)換成cDNA片斷文庫。隨后將測(cè)序接頭(藍(lán)色)添加到每個(gè)cDNA片段,并使用高通量測(cè)序技術(shù)從每個(gè)cDNA獲得短序列。將得到的序列讀數(shù)與參考基因組或轉(zhuǎn)錄組比對(duì),并將其分為三種類型:exonic reads、junction reads、poly(A) end reads

4.轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)處理

4.1原始數(shù)據(jù)預(yù)處理

4.2reads比對(duì)

4.3轉(zhuǎn)錄本組裝

4.4轉(zhuǎn)錄本預(yù)測(cè)

4.5轉(zhuǎn)錄本表達(dá)水平分析

4.6變異檢測(cè)

參考文獻(xiàn)

Wang Z , Gerstein M , Snyder M . RNA-Seq: a revolutionary tool for transcriptomics.[J]. Nature reviews. Genetics, 2009, 10(1):57.

崔凱, 吳偉偉與刁其玉, 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)的研究和應(yīng)用進(jìn)展. 生物技術(shù)通報(bào), 2019. 35(07): 第1-9頁.

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