形成期：
藥物成癮形成過(guò)程中的用藥期、戒斷期和復(fù)吸期，分別對(duì)應(yīng)行為敏化模型中的形成期、轉(zhuǎn)化期和激發(fā)期。在接受CBD或METH之前，小鼠被放置在活動(dòng)檢測(cè)箱內(nèi)，每天自由活動(dòng)30min，連續(xù)2天。其中共有4個(gè)階段分別為預(yù)適應(yīng)期、形成期、轉(zhuǎn)化期和激發(fā)期。預(yù)適應(yīng)期間，將小鼠放入自發(fā)活動(dòng)箱中，讓其自由活動(dòng)30min，共2天。取2天小鼠運(yùn)動(dòng)距離的均值降序排列，按照運(yùn)動(dòng)距離均衡分組。然后進(jìn)入形成期訓(xùn)練，期間給予鹽水或METH后，放入箱內(nèi)測(cè)試90min，共6天，記錄小鼠每天的運(yùn)動(dòng)距離。接下來(lái)，進(jìn)入轉(zhuǎn)化期，所有小鼠放入飼養(yǎng)籠飼養(yǎng)，期間均不給予任何處理，共7天。最后，在激發(fā)期，所有小鼠給予METH后放入箱內(nèi)自由活動(dòng)90min，記錄小鼠的運(yùn)動(dòng)距離。
為了觀察形成期伴隨給予CBD對(duì)METH誘發(fā)小鼠行為敏化形成的影響。首先將小鼠按照2天預(yù)適應(yīng)期的運(yùn)動(dòng)距離平均分為鹽水組（空白對(duì)照組）、溶劑組（METH模型組）以及CBD處理組（20，40和80mg／kg），每組11只。形成期連續(xù)6天每天測(cè)試前30min分別腹腔注射溶劑或CBD（20，40和80mg／kg）后，放置籠子中，然后分別腹腔注射鹽水或METH放入自發(fā)活動(dòng)箱中測(cè)試90min，記錄小鼠的運(yùn)動(dòng)距離。觀察形成期第1天單次給予CBD對(duì)METH誘發(fā)小鼠急性高活動(dòng)性的影響。接下來(lái)，所有小鼠經(jīng)過(guò)7天轉(zhuǎn)化期后給予小劑量METH（0．5mg／kg）點(diǎn)燃測(cè)試90min，記錄小鼠的運(yùn)動(dòng)距離，觀察形成期伴隨給予CBD對(duì)METH誘發(fā)小鼠行為敏化形成的作用。
轉(zhuǎn)化期：
為了觀察轉(zhuǎn)化期連續(xù)給予CBD對(duì)METH誘發(fā)小鼠行為敏化點(diǎn)燃的影響。形成期連續(xù)6天每天腹腔注射鹽水）或METH，測(cè)試90min內(nèi)小藏的運(yùn)動(dòng)距離，METH處理組小鼠形成敏化后（第6天與第1天比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異），然后根據(jù)敏化的形成程度進(jìn)行均衡分組。轉(zhuǎn)化期連續(xù)7天每天分別腹腔注射溶劑或CBD（20，40和80mg／kg），最后激發(fā)期腹腔注射小劑量METH測(cè)試90min內(nèi)小鼠的運(yùn)動(dòng)距離，此時(shí)距離最后一次給予溶劑或CBD干預(yù)24h。觀察轉(zhuǎn)化期連續(xù)給予CBD對(duì)METH誘發(fā)小鼠行為敏化點(diǎn)燃的作用。
激發(fā)期：
為了觀察激發(fā)期單次急性給予CBD對(duì)METH誘發(fā)小鼠行為敏化點(diǎn)燃的影響。形成期連續(xù)6天每天分別腹腔注射鹽水或METH，METH處理組小鼠建立敏化模型后，進(jìn)入轉(zhuǎn)化期，期間無(wú)任何藥物處理。激發(fā)期測(cè)試前30min分別腹腔注射溶劑或CBD（20，40和80mg／kg），然后腹腔注射小劑量METH（0.5mg／kg）后放入自發(fā)活動(dòng)箱內(nèi)測(cè)試90min。觀察激發(fā)期單次給予CBD對(duì)METH誘發(fā)小鼠行為敏化點(diǎn)燃的作用。
藥物成癮被認(rèn)為是一種病理性學(xué)習(xí)記憶，而成癮記憶的過(guò)程主要分為形成、鞏固、提取、再鞏固、消退和重現(xiàn)。CPP模型側(cè)重于將藥物成癮的病理性學(xué)習(xí)記憶及用藥動(dòng)機(jī)突顯能力通過(guò)特定的行為學(xué)表現(xiàn)進(jìn)行量化測(cè)量。在CPP模型的形成期，METH匹配訓(xùn)練前處于成癮記憶的形成階段，METH匹配訓(xùn)練后處于成癮記憶的鞏固階段；在CPP模型的表達(dá)期，無(wú)METH處理進(jìn)行自由測(cè)試處于成癮記憶的提取階段，伴藥箱暴露后6h以?xún)?nèi)處于成癮記憶的再鞏固階段；在CPP模型的消退期，伴藥箱給予鹽水或干預(yù)藥物進(jìn)行條件性消退訓(xùn)練處于成癮記憶的消退階段；在CPP模型的點(diǎn)燃期，提前給予小劑量藥物進(jìn)行點(diǎn)燃測(cè)試處于成癮記憶的重現(xiàn)階段。
本實(shí)驗(yàn)采用的CPP訓(xùn)練程序按照為非偏性均衡訓(xùn)練程序。即每組小鼠一半采用黑箱伴藥，一半采用白箱伴藥。偶數(shù)天進(jìn)行伴藥箱訓(xùn)練，奇數(shù)天進(jìn)行非伴藥箱訓(xùn)練。其中共有5個(gè)階段分別為預(yù)適應(yīng)期、形成期、表達(dá)期、消退期和點(diǎn)燃期CPP分值（CPP score）用于衡量CPP效應(yīng)，統(tǒng)計(jì)后2天黒白箱停留時(shí)間均值的差值（即伴藥箱與非伴藥箱停留時(shí)間的差值表示），排除CPP分值大于300s的小鼠，并將余下小鼠按照CPP分值平均分組，即每組黑箱伴藥和白箱伴藥小鼠數(shù)量各一半。在預(yù)適應(yīng)期間，拿掉隔板，將小鼠放入中間箱，讓其在各箱間自由活動(dòng)15min，記錄小鼠在各箱間的停留時(shí)間，共3天。然后根據(jù)CPP分值進(jìn)行均衡分組。然后進(jìn)入形成期訓(xùn)練，插上隔板，小鼠給予鹽水（10ml／kg）或METH（1mg／kg）放入伴藥箱訓(xùn)練1h，次日給予鹽水（10ml／kg）后放入非伴藥箱訓(xùn)練1h，共10天。形成訓(xùn)練后進(jìn)行表達(dá)測(cè)試，測(cè)試當(dāng)天，將隔板拿掉，將小鼠放入中間箱，使其在各箱間自由活動(dòng)15min記錄測(cè)試時(shí)小鼠在各箱間的停留時(shí)間。接下來(lái)進(jìn)行消退期，期間采用條件性消退學(xué)習(xí)訓(xùn)練，伴藥箱與非伴藥箱交替訓(xùn)練均給予鹽水，每次1h，共4天，進(jìn)行第1次消退測(cè)試，然后加訓(xùn)4天，進(jìn)行第2次消退測(cè)試，直至各組小鼠CPP得分與前側(cè)值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。最后進(jìn)行點(diǎn)燃測(cè)試，測(cè)試當(dāng)日將隔板拿掉，所有小鼠均給予小劑量METH（0.5mg／kg）點(diǎn)燃后，立即放入中間箱并自由活動(dòng)15min，記錄小鼠在各箱間的停留時(shí)間。
文獻(xiàn)引用：
姚敏. 大麻二酚對(duì)抗甲基苯丙胺誘導(dǎo)動(dòng)機(jī)敏化及獎(jiǎng)賞記憶的作用研究[D].南京中醫(yī)藥大學(xué),2024.
Cannabidiol modulates the METH-induced conditioned place preference through D2-like dopamine receptors in the hippocampal CA1 region[J]. Hassanlou Amir Arash;Jamali Shole;RayatSanati Kimia;Mousavi Zahra;Haghparast Abbas.Brain Research Bulletin,2021
Cannabidiol prevents several of the behavioral alterations related to cocaine addiction in mice.[J]. Ledesma Juan Carlos;Manzanedo Carmen;Aguilar María A.Progress in neuro-psychopharmacology & biological psychiatry,2021
Cannabidiol promotes neurogenesis in the dentate gyrus during an abstinence period in rats following chronic exposure to methamphetamine[J]. Yasaman Razavi;Fariborz Keyhanfar;Abbas Haghparast;Ronak Shabani;Mehdi Mehdizadeh.Metabolic Brain Disease,2021
