產(chǎn)品概述
本品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的針對(duì)Pumilio 1（PUM1）蛋白的山羊多克隆抗體，貨號(hào)A300-201A。該抗體可識(shí)別人及小鼠來(lái)源的Pumilio 1，適用于免疫沉淀（IP）和蛋白質(zhì)印跡（WB）檢測(cè)。抗體經(jīng)抗原親和純化，濃度高達(dá)1000 μg/ml，為高靈敏度RNA結(jié)合蛋白研究提供了可靠工具。
核心規(guī)格參數(shù)
項(xiàng)目?| 詳細(xì)信息
靶點(diǎn)?| Pumilio 1 (PUM1)
反應(yīng)性?| 小鼠、人
應(yīng)用?| IP, WB
宿主?| 山羊
免疫原?| 第225-275位氨基酸區(qū)域
克隆性?| 多克隆
形式?| 完整IgG
亞型?| IgG
偶聯(lián)物?| 非偶聯(lián)
純度?| 抗原親和純化
抗原物種?| 人
濃度?| 1000 μg/ml
保存條件?| 2-8 °C
有效期?| 收貨之日起1年
緩沖液?| Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊氮化鈉
應(yīng)用方法與推薦稀釋度
蛋白質(zhì)印跡（WB）
所有WB實(shí)驗(yàn)使用含5%脫脂牛奶的TBST作為封閉液及抗體稀釋液。一抗孵育條件為過(guò)夜孵育。
二抗系統(tǒng)：使用驢抗山羊IgG重鏈和輕鏈抗體（貨號(hào)A50-101P）作為二抗。
推薦稀釋度：1:2000 1:10,000
操作要點(diǎn)：
封閉充分可降低非特異性背景
一抗過(guò)夜孵育建議在4°C條件下進(jìn)行
洗膜步驟建議使用TBST洗滌3次，每次5-10分鐘
免疫沉淀（IP）
推薦用量：6 μg 抗體 / mg 細(xì)胞裂解液
操作建議：
1. 將6 μg抗體與含1 mg蛋白的細(xì)胞裂解液混合
2. 4°C孵育1-2小時(shí)或過(guò)夜
3. 加入蛋白A/G瓊脂糖珠，繼續(xù)孵育1-2小時(shí)
4. 充分洗滌沉淀復(fù)合物（建議4-5次）
5. 使用SDS上樣緩沖液洗脫，煮沸變性后進(jìn)行WB檢測(cè)
產(chǎn)品背景信息
蛋白功能概述
Pumilio 1（Pumilio同源物1）是一種進(jìn)化上高度保守的RNA結(jié)合蛋白，主要作為翻譯調(diào)控因子，參與胚胎發(fā)生和生殖細(xì)胞發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)調(diào)控。該蛋白在多種組織類型中廣泛表達(dá)，與生殖細(xì)胞特異性的Pumilio 2具有同源性。
分子機(jī)制
Pumilio 1通過(guò)其C端RNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域識(shí)別靶mRNA的特定序列（通常為“UGUANAUA”基序），招募其他翻譯抑制因子（如CNOT死烯化復(fù)合物），從而抑制靶mRNA的翻譯或促進(jìn)其降解。該機(jī)制在干細(xì)胞維持、神經(jīng)元突觸可塑性及細(xì)胞衰老過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
研究意義
Pumilio 1功能異常與多種疾病相關(guān)，包括神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育缺陷、癌癥進(jìn)展及生殖障礙。因此，高特異性的Pumilio 1抗體對(duì)于以下研究至關(guān)重要：
RNA-蛋白相互作用分析
翻譯調(diào)控機(jī)制解析
疾病模型中Pumilio 1表達(dá)水平的定量檢測(cè)
免疫共沉淀結(jié)合質(zhì)譜鑒定新型相互作用蛋白
別名列表
HSPUM
PUMH
PUMH1
pumilio homolog 1
pumilio-1
PUML1
SCA47
保存與穩(wěn)定性注意事項(xiàng)
1. 保存溫度：2-8°C，請(qǐng)勿冷凍。反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性及活性損失。
2. 有效期：收貨之日起1年內(nèi)穩(wěn)定。
3. 防腐劑：緩沖液中含有0.09%疊氮化鈉作為防腐劑，使用時(shí)應(yīng)遵守相關(guān)實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范（如避免攝入、接觸皮膚）。
4. 分裝建議：若需長(zhǎng)期使用，可將抗體分裝成單次用量的小份，分裝后仍應(yīng)保存于2-8°C，避免冷凍。
功能性優(yōu)勢(shì)總結(jié)
1. 高濃度配方（1000 μg/ml）：減少抗體使用體積，便于實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及長(zhǎng)期批量實(shí)驗(yàn)的一致性。
2. 親和純化工藝：特異性識(shí)別Pumilio 1第225-275位氨基酸區(qū)域，與非特異性蛋白交叉反應(yīng)極低。
3. 廣譜反應(yīng)性：同時(shí)識(shí)別人和小鼠樣本，適用于跨種屬比較研究。
4. 雙重應(yīng)用驗(yàn)證：IP與WB均經(jīng)過(guò)優(yōu)化驗(yàn)證，降低方法開(kāi)發(fā)的時(shí)間成本。
5. 明確的工作濃度：WB（1:2000-1:10000）和IP（6 μg/mg裂解液）提供具體起始條件，便于快速?gòu)?fù)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
常見(jiàn)應(yīng)用場(chǎng)景舉例
應(yīng)用場(chǎng)景?| 推薦實(shí)驗(yàn)方案
細(xì)胞系中Pumilio 1表達(dá)量檢測(cè) | WB，1:5000稀釋，檢測(cè)30-50 μg總蛋白
小鼠組織裂解液中蛋白水平比較?| WB，1:4000稀釋，使用組織特異性內(nèi)參
內(nèi)源性Pumilio 1免疫共沉淀 | IP（6 μg/mg裂解液），結(jié)合WB檢測(cè)或質(zhì)譜分析
RNA結(jié)合蛋白復(fù)合物純化 | IP后提取RNA進(jìn)行qRT-PCR或測(cè)序
