完整報(bào)告熒光共定位的定量分析結(jié)果總共需要以下元素:
● ①紅色通道熒光圖像和散點(diǎn)圖
●?②綠色通道熒光圖像和散點(diǎn)圖
●?③熒光共定位圖像和散點(diǎn)圖
●?④熒光共定位圖像皮爾遜相關(guān)系數(shù)和重疊系數(shù)
前面2期內(nèi)容,將熒光共定位散點(diǎn)圖獲取、2個(gè)系數(shù)以及散點(diǎn)圖解析說(shuō)完了。沒(méi)有看的可以再回顧一下。
發(fā)現(xiàn)沒(méi)?
咱們還少了單通道散點(diǎn)圖。這個(gè)散點(diǎn)圖是為了報(bào)告單通道情況下的熒光強(qiáng)度和背景情況,也是很重要的指標(biāo)。
有了前面的基礎(chǔ),本次操作就非常簡(jiǎn)單了。
圖文步驟
1. 用Image Pro Plus打開(kāi)一紅色通道圖像,然后選擇Co-localiazation。
2.按照如下設(shè)置,然后點(diǎn)擊Forward。
3.?得到紅色通道散點(diǎn)圖。
可以看出散點(diǎn)非常貼近X軸線,且代表背景的散點(diǎn)區(qū)域也很干凈,說(shuō)明紅色通道熒光的整體情況較好。
既然是單通道,必然不涉及共定位系數(shù)了。
4. 采用同樣的操作方法,得到綠色通道散點(diǎn)圖。
可以看到散點(diǎn)非常貼近Y軸線,背景區(qū)域干凈,說(shuō)明綠色通道熒光的整體情況也挺好。(PS:遇到這種實(shí)驗(yàn)結(jié)果,肯定是燒高香了!)
終于集齊所有元素,下期(也就是終章)將介紹熒光共定位定量分析的組圖方式和報(bào)告形式,到時(shí)你會(huì)得到下面一張圖。
下期預(yù)告:組圖方式和報(bào)告形式