裸鼠腫瘤模型是比較常見和常用的一種腫瘤動物模型，它在皮下移植瘤腫瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠腫瘤模型的接種一般有細胞接種和瘤塊接種兩種方式，接種取材有手術活檢標本、癌性胸腹水標本和體外培養(yǎng)的細胞系三種 。
裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點。
裸鼠移植瘤實驗常用于檢測細胞的成瘤能力/抗腫瘤藥物的抗癌作用、
實驗準備：
- 0.25%的胰酶，含血清的培養(yǎng)基，PBS或者生理鹽水
- 1ml注射器，細胞計數(shù)器，酒精棉球
實驗操作步驟：
- 將計數(shù)板及蓋玻片沖洗干凈，晾干
- 常規(guī)消化細胞，離心
- 加入適量PBS重懸細胞，使之成為單細胞懸液
- 按照一定稀釋倍數(shù)西施細胞懸液
- 細胞計數(shù)
- 取5*10^6個細胞，再次離心收集細胞沉淀
- 用0.2mlPBS或者生理鹽水重懸細胞，分別放入0.5ml的EP管中，封口膜封口
- 選擇4~6周齡的裸鼠，將裸鼠背部皮膚消毒
- 用1ml注射器吸取細胞懸液，將其注射入裸鼠皮下
- 以后每天觀察裸鼠生存情況以及移植瘤的情況，測量腫瘤大小
11.待早腫瘤生長至直徑約1.5~2cm大小時，脫頸法處死小鼠，取出腫瘤，稱重，測量瘤體大小并計算體積
12.統(tǒng)計學分析
注意事項
- 細胞重懸時要將細胞懸液制備成單細胞懸液
- 計數(shù)前應將細胞徹底混勻，稀釋至合適的濃度，計數(shù)一定要精準
一般實驗中要將裸鼠分組，應該采取隨機分組的辦法，并且每組裸鼠的數(shù)量原則上越多越好，但是考慮到實驗成本，一般選取每組5~10只。預實驗時，選擇3只可以做統(tǒng)計學分析即可
細胞計數(shù)后，用PBS或者生理鹽水重懸細胞時，最好不要超0.2ml。在接種細胞的數(shù)目上，一般情況選擇5~1010^6個細胞。若是想很快就觀察到成瘤情況，可以接種多一點，反之，少一點
在荷瘤裸鼠動物模型建立以后，可以觀察的指標很多，比如腫瘤體積（長寬寬0.5）**，繪制成瘤曲線
裸鼠存活時間
處理前后瘤體大小，重量
處理前后腫瘤的HE染色或者免疫組化染色 ，根據(jù)前期的實驗設計來選擇
乳房脂肪墊移植瘤：
細胞系：
ER（+）：MCF-7（來源：乳腺腺癌），ZR-75-30（乳腺導管癌），T47D（乳腺導管癌），ZR-75（乳腺腺癌）。
ER（-）：MDA-MB-435s（乳腺導管癌），MDA-MB-435（乳腺導管癌），SK-BR-3 （乳腺腺癌），MDA-MB-231（乳腺腺癌），MDA-MB-453（乳腺腺癌）。
作為乳腺癌細胞移植裸鼠的選擇, 推薦：ER（+）選用MCF-7和ZR-75-30；ER（—）選用MDA-MB-435s和MDA-MB-231。這幾株細胞成瘤率較高。
注意事項
①將HBC細胞植入裸鼠的乳房脂肪墊（Mammary fad pat，mfp），又稱原位移植（相反則稱異位移植），不僅可以提高乳腺癌細胞的成瘤率而且可以增加轉移的發(fā)生率。
②促進腫瘤細胞在裸鼠體內形成腫瘤的方法是將癌細胞和Matrigel或成纖維細胞混合后注入裸鼠體內。Matrigel是由層粘連蛋白、Ⅳ型膠原纖維、硫酸乙酰肝素和巢蛋白組成的混合物，在4℃為液體，而在37℃則聚合形成一種凝膠。
③裸鼠的選擇
Balb/c、 nu/nu雌性裸鼠 (SPF級)，4-6周齡，體重18-22g，預實驗選用Balb/c小鼠，用于mfp的解剖。
參考：
《細胞與分子生物學常用技術》
https://zhuanlan.zhihu.com/p/478791842
https://www.jingege.wang/2020/06/06/%E8%82%BF%E7%98%A4%E7%A0%94%E7%A9%B6%E5%BF%85%E7%94%A8%E6%A8%A1%E5%9E%8B%EF%BC%9A%E8%BD%AC%E7%A7%BB%E5%8A%A8%E7%89%A9%E6%A8%A1%E5%9E%8B%E7%9A%84%E6%9E%84%E5%BB%BA%EF%BC%88%E4%B8%8A%EF%BC%89%EF%BC%88/
