Alexa Fluor 647與Cy5偶聯(lián)物的光譜及濾光器相匹配。Alexa Fluor 647二抗偶聯(lián)物的總熒光亮度高于Cy5偶聯(lián)物。在與大多數(shù)的蛋白質(zhì)、寡核苷酸和核酸結(jié)合時(shí),Alexa Fluor 647相比Cy5?熒光吸收光譜波動(dòng)很小,因此在同等程度的替換時(shí)發(fā)出的熒光更強(qiáng)。Alexa Fluor是熒光標(biāo)記試劑的一大突破,包括一系列近紫外、可見光和近紅外光譜的優(yōu)良染料,這些試劑產(chǎn)生的偶聯(lián)物無一例外是實(shí)驗(yàn)檢測過最好和最亮的,Alexa Fluor熒光染料具有較寬的激發(fā)和發(fā)射波段,在從藍(lán)光到遠(yuǎn)紅光的寬泛范圍內(nèi)提供了多色檢測和FRET(熒光共振能量轉(zhuǎn)移)的多種選擇。與傳統(tǒng)的熒光團(tuán)相比,具有發(fā)光亮度更強(qiáng),靈敏度更高,背景更低的優(yōu)勢,同時(shí)其對pH的穩(wěn)定性更好,發(fā)光 也更持久,因此更適合于拍照。Alexa Fluor熒光熒光染料作為熒光顯微鏡、細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)內(nèi)的生物分子、細(xì)胞和組織標(biāo)記物,可應(yīng)用于生物技術(shù)和研 究等眾多領(lǐng)域。

艾美捷Alexa Fluor 647標(biāo)記親和純化驢抗豚鼠IgG(H+L)二抗(血清蛋白吸附):
貨號:706-605-148
靶標(biāo):豚鼠??
宿主:驢??
抗體形式:全I(xiàn)gG ?
特異性:IgG(H+L) ?
最小交叉反應(yīng)性:牛、雞、山羊、敘利亞倉鼠、馬、人、小鼠、兔、大鼠、綿羊血清蛋白??
偶聯(lián)物:Alexa Fluor 647 ?
產(chǎn)品類別:全I(xiàn)gG親和純化抗體 ?
克隆性:多克隆??
物理狀態(tài):凍干固體??
儲存與復(fù)溶:凍干固體應(yīng)于2-8°C下保存。使用標(biāo)示體積的去離子水(參見產(chǎn)品說明書)復(fù)溶,如有渾濁可離心澄清。使用當(dāng)天制備工作濃度。產(chǎn)品在2-8°C下作為未稀釋液體可穩(wěn)定保存約6周。 ?
復(fù)溶后的長期儲存:分裝后于-70°C或更低溫度下冷凍保存。避免反復(fù)凍融?;蛘?,加入等體積的甘油(ACS級或更優(yōu)),使最終濃度達(dá)到50%,并以液體形式在-20°C下保存。 ?
有效期:自復(fù)溶之日起一年。如果測試結(jié)果符合預(yù)期用途,有效期可以延長。
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純度:抗體通過免疫親和色譜法從抗血清中純化,使用與瓊脂糖珠偶聯(lián)的抗原進(jìn)行純化。??
緩沖液:0.01M磷酸鈉、0.25M氯化鈉,pH 7.6 ?
穩(wěn)定劑:15 mg/ml牛血清白蛋白(無IgG、無蛋白酶) ?
防腐劑:0.05%疊氮化鈉
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建議的工作濃度或稀釋范圍:?大多數(shù)應(yīng)用為1:100 - 1:800
稀釋因子以范圍形式給出,因?yàn)樽罴严♂尪仁嵌喾N因素的函數(shù),例如抗原密度、通透性等。實(shí)際使用的稀釋度必須通過實(shí)驗(yàn)確定。
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Alexa Fluor 647 ?
最大吸收波長(Amax):651 nm ?
最大發(fā)射波長(Emax):667 nm ?
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Alexa Fluor 647偶聯(lián)抗體在651 nm處吸收光最強(qiáng),熒光峰在667 nm左右。在水性封片介質(zhì)中,它們比Cy5和DyLight 650更亮。當(dāng)需要這些波長的熒光二抗時(shí),Alexa Fluor 647和APC偶聯(lián)的二抗是流式細(xì)胞術(shù)的最佳選擇。Alexa Fluor 647偶聯(lián)物是共聚焦顯微鏡多重標(biāo)記檢測中遠(yuǎn)紅色熒光染料的最佳選擇。
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使用Alexa Fluor 647相較于低波長發(fā)射染料的一個(gè)顯著優(yōu)勢是,生物樣本在此光譜區(qū)域的自發(fā)熒光較低。然而,由于其在667 nm處的峰值發(fā)射,Alexa Fluor 647用肉眼難以觀察,并且無法通過汞燈進(jìn)行最佳激發(fā)。因此,不建議將Alexa Fluor 647用于傳統(tǒng)落射熒光顯微鏡。它通常通過配備適當(dāng)激光激發(fā)器和遠(yuǎn)紅光探測器的共聚焦顯微鏡進(jìn)行可視化。在流式細(xì)胞術(shù)中,Alexa Fluor 647偶聯(lián)物是allophycocyanin偶聯(lián)物的更經(jīng)濟(jì)的替代品。