三十六策 第 4 策 分子點(diǎn)睛
疾、型、模、法、標(biāo)五恒量是一個(gè)研究方向的通用體系、常規(guī)套路。
分子這里主要是指 DNA，RNA，蛋白這些生物大分子。
第一個(gè)問(wèn)題，怎么來(lái)證明一個(gè)分子有某個(gè)方面的功能表型?
變量代入恒量，最基本的科學(xué)假設(shè)，就是在什么疾病中分子能夠介導(dǎo)某種表型。證明一個(gè)分子有某個(gè)方面的功能表型的方法，就是操作分子，人為的改變這個(gè)分子的表達(dá)，讓這個(gè)分子表達(dá)上升，觀察到表型， 然后再把這個(gè)分子表達(dá)降低，觀察到表型消失了，這就證明了表型的存在與分子的上下表達(dá)有明顯的相關(guān)性，由此你可以下結(jié)論。
驗(yàn)證分子和表型的關(guān)系，需要通過(guò)操縱分子觀察表型來(lái)建立因果關(guān)系。
過(guò)表達(dá)：在一個(gè)細(xì)胞模型中過(guò)表達(dá)一個(gè)分子的手段一共有兩類，一是質(zhì)粒，二是病毒。
質(zhì)粒：是一種環(huán)狀的 DNA 分子，能夠把一段特定序列編碼 DNA 轉(zhuǎn)錄出 RNA 來(lái)，接著 RNA 再翻譯成蛋白。把質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞→轉(zhuǎn)染：脂質(zhì)體、電穿孔、鈣轉(zhuǎn)。轉(zhuǎn)染 Transfection，轉(zhuǎn)導(dǎo) Transduction， 轉(zhuǎn)化 Transformation（質(zhì)粒在大腸桿菌里做轉(zhuǎn)化）。
病毒：為了對(duì)付一些難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。目的都是為了運(yùn)輸 基因到細(xì)胞里，實(shí)現(xiàn)基因的過(guò)表達(dá)。
正反雙向研究：圍繞一個(gè)分子找到相對(duì)高表達(dá)的和相對(duì)低表達(dá)的細(xì)胞，在高表達(dá)的里面抑制分子，在低表達(dá)的里面過(guò)表達(dá)分子就能實(shí)現(xiàn)正反雙向研究。
RNAi ：合成一段 21 個(gè)堿基的 siRNA，轉(zhuǎn)染到細(xì)胞里就能對(duì)目標(biāo)基因?qū)崿F(xiàn) 70%以上的表達(dá)沉默。
第二個(gè)問(wèn)題，分子有很多具體類型
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DNA：
腫瘤中 DNA 的突變，缺失，重排已經(jīng)被證明是一大驅(qū)動(dòng)因素。
表觀遺傳學(xué)是指基因序列不變情況下，基因表達(dá)水平的改變：DNA 甲基化，RNA 編輯，蛋白修飾
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RNA
編碼基因的 mRNA
非編碼 RNA：miRNA、lncRNA、circRNA
總結(jié)
證明分子與表型之間關(guān)系的 Gain of function 和 Loss of function 一正一反兩種方法
