探序基因腫瘤研究院? 整理

A. 配置瓊脂糖凝膠。（以制作小膠，30ul為例）

1、制膠(1%)：將加入30ml 1×TAE緩沖液和0.3g瓊脂糖的三角瓶在微波爐加熱至沸騰，搖勻至無顆粒。也可以用水浴鍋加熱煮沸，注意要用猛火。

2、倒膠：先插梳子，再倒膠。膠冷卻至60℃左右(不燙手)加染料后（膠-GelRed:1ml-1ul或30ml膠+3ulGelRed）緩緩倒入電泳槽 (先膠布封口，放好梳子)，待膠凝固后取出梳子。

B. 配置電泳槽

將1×TAE緩沖液倒入電泳槽中。

C. 加DNA樣本到凝膠的小孔上。注意小孔的大小，小孔一般能放10多ul

為了成像清晰，建議DNA樣本要10ng以上。5ul的樣本溶液混合1ul的loading buffer。具體可參考loading buffer的說明書查看加的量

D. 電泳跑膠

穩(wěn)壓條件下120V電泳，待溴酚藍移動至接近膠前沿(約1cm)時停止電泳(約25min)。具體電泳時間要自己摸索，應該是要20-40分鐘左右。

F. 查看跑膠結果

可使用專門的凝膠成像儀，也可使用便攜的藍光切膠儀。但是如果DNA樣本的濃度低，藍光切膠儀將看不到DNA跑膠的條帶。

參考視頻：

bilibili-瓊脂糖凝膠的制備

bilibili-瓊脂糖凝膠電泳

其他總結：