背景

1.圖片來(lái)源。DAB顯色的免疫組化圖片

2.輸出的結(jié)果。

統(tǒng)計(jì)用的結(jié)果是density（mean）

3.光密度（OD）反映蛋白的量。

灰度值：黑0----白255。

步驟

1.光密度校正。具體步驟很容易查到。

2.設(shè)置測(cè)量參數(shù)。 area 和IOD

面積過(guò)濾值=100

顯示選項(xiàng)中：

?NO fill holes， smooth=2，?

選area 和IOD

如圖設(shè)置

3.保存測(cè)量環(huán)境文件

4.手工描繪測(cè)量區(qū)域

5.選擇色彩。選擇HSI

H:0-29

S:不動(dòng)

I:MAX=光密度校正的背景值相同（靠近255一端）

根據(jù)圖片的顯色，可以適當(dāng)微調(diào)HSI

最后保存選色文件。file-save-

6.設(shè)置數(shù)據(jù)收集器

image----name

count/size----area(---sum) and ?IOD(---sum)

7.測(cè)量

測(cè)量選擇區(qū)域面積：edit-count aoi to objects

在data collector中讀取測(cè)量數(shù)據(jù)

然后，delete 測(cè)量

重新點(diǎn)AOI自主描繪窗口工具，之前畫的框就會(huì)自動(dòng)出現(xiàn)

點(diǎn)擊count---在data collector中讀取測(cè)量數(shù)據(jù)

小IOD除以大Area.=平均光密度值

8.數(shù)據(jù)整理

同一樣品不同視野的結(jié)果取均值=一份樣品的結(jié)果

同一處理組的不同樣品的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

注意事項(xiàng)

1.圖片的拍攝條件不能變。相同光亮，相同放大倍數(shù)，相同曝光條件。

2.不能使用自動(dòng)拍照功能，必須手動(dòng)拍照。

3.曝光條件。將空白區(qū)域調(diào)整到視野中央，通過(guò)曝光，使灰度值在230左右，然后校正白平衡，使它顯示純白色。

資料來(lái)源鏈接：免疫組化Image pro plus