亞細胞定位怎么做

是指某種蛋白或某個基因表達產(chǎn)物在細胞內(nèi)的具體存在部位，如在胞核，胞漿內(nèi)，細胞膜或某一特定細胞器上存在。蛋白分布在不同細胞的不同部位，對蛋白的亞細胞定位分析有助于蛋白功能研究的初步判斷。
GFP是綠色熒光蛋白，在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會發(fā)出綠色熒光，從而可以精確地定位蛋白質(zhì)的位置。GFP實際是給你要研究的物質(zhì)加上標記，在此相當(dāng)于報告蛋白的作用。使用GFP必須構(gòu)建融合蛋白載體，并在轉(zhuǎn)染之后有效表達。這樣，若在熒光顯微鏡下看到細胞內(nèi)某一部位存在GFP信號，說明和GFP融合的蛋白也存在于該部位，這樣就達到了確定某物質(zhì)亞細胞定位的目的。利用生物信息學(xué)軟件進行亞細胞定位預(yù)測分析輔助于實驗操作，能夠更加精準的定位蛋白質(zhì)的位置。

亞細胞定位基本技術(shù)路線：

提供序列信息或質(zhì)?；蚓辍獊喖毎ㄎ活A(yù)測軟件分析——植物過表達載體構(gòu)建——轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌——農(nóng)桿菌介導(dǎo)法浸染煙草或者水稻——亞細胞定位——激光共聚焦掃描

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作者：瑞源生物
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來源：知乎
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