基因的表觀遺傳激活或失活在許多重要的人類疾病中,尤其是在癌癥中,扮演著關(guān)鍵角色。
表觀遺傳基因失活的主要機(jī)制是由于?DNA?甲基轉(zhuǎn)移酶引起的基因組?DNA?中?CpG?島的甲基化。組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMTs)通過(guò)染色質(zhì)依賴的轉(zhuǎn)錄抑制或激活來(lái)控制或調(diào)節(jié)?DNA?甲基化。HMTs?將?1-3?個(gè)甲基基團(tuán)從?S-腺苷?- L -?甲硫氨酸轉(zhuǎn)移到組蛋白的賴氨酸和精氨酸殘基上。SETDB?是主要的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶,它催化哺乳動(dòng)物細(xì)胞中組蛋白?H3?在賴氨酸?9(H3K9)處的三甲基化。JHDMs?和?JMJDs?是主要的組蛋白去甲基化酶,負(fù)責(zé)去甲基化?H3K9。三甲基?H3K9(H3K9me3)一直被視為轉(zhuǎn)錄抑制基因的標(biāo)志性標(biāo)記,它僅位于啟動(dòng)子下游的?5'?區(qū)域。H3K9me3?也可以通過(guò)抑制或激活?HMTs?來(lái)改變。在血漿或血清中觀察到并被證實(shí)為許多不同疾病或病理變化(如癌癥進(jìn)展)的標(biāo)記物的循環(huán)組蛋白?H3K9me3。因此,檢測(cè)循環(huán)?H3K9me3?將為更好地理解基因激活和沉默的表觀遺傳調(diào)控、與組蛋白修飾相關(guān)的病理過(guò)程、疾病相關(guān)生物標(biāo)志物的篩選以及開(kāi)發(fā)針對(duì)組蛋白修飾的藥物提供有用的信息。
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EpiQuik? 循環(huán)三甲基組蛋白?H3K9 ELISA?試劑盒(比色法)是一套便捷的工具包,允許實(shí)驗(yàn)者從人類、小鼠或大鼠的生物液體樣本(如血漿和血清)中特異性地測(cè)量循環(huán)三甲基組蛋白?H3K9(H3K9me3)。 ?
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艾美捷EpiQuik循環(huán)三甲基組蛋白H3K9 ELISA試劑盒(比色法)(#P-3118-48)優(yōu)勢(shì)與特點(diǎn):
快速高效的實(shí)驗(yàn)流程,可在?2.5?小時(shí)內(nèi)完成。
高靈敏度和特異性。檢測(cè)限低至?0.5 ng/孔,血漿/血清在指定量范圍內(nèi)(1-20 ng/孔)的動(dòng)態(tài)范圍。僅識(shí)別?H3K9me3,與未修飾的?H3?或同一賴氨酸位點(diǎn)的其他修飾無(wú)交叉反應(yīng)。
方便地包含對(duì)照,用于?H3K9me3?的定量。
條帶微孔板格式使實(shí)驗(yàn)具有靈活性:可手動(dòng)或高通量操作。
簡(jiǎn)單、可靠且一致的實(shí)驗(yàn)條件。??
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原理與實(shí)驗(yàn)流程:
EpiQuik??循環(huán)三甲基組蛋白?H3K9 ELISA?試劑盒(比色法)是專為測(cè)量血漿或血清中的總?H3K9me3?而設(shè)計(jì)的。
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在使用該試劑盒進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)中,血漿/血清樣本中?K9?位點(diǎn)三甲基化的組蛋白?H3?蛋白會(huì)被固定在涂有抗?H3K9me3?抗體的條帶孔中。捕獲的?H3K9me3?蛋白隨后可被檢測(cè)抗體識(shí)別,再通過(guò)顯色試劑進(jìn)行顯色。H3K9me3?的比例與吸光度強(qiáng)度成正比。通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照比較,可以定量測(cè)定?H3K9me3?的絕對(duì)量。

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起始材料:
起始材料應(yīng)為血漿或血清。每次實(shí)驗(yàn)的血漿或血清用量為?10?至?40 uL,最佳用量為?30uL。