1##一代測(cè)序
sanger測(cè)序，雙脫氧核苷酸ddNTP會(huì)結(jié)合所有位點(diǎn)，
設(shè)置四個(gè)反應(yīng)體系1-4，分別加入引物、DNA聚合酶、四種dNTP、一定比例的ddNTP（帶有放射性標(biāo)記）ddATP遇到了T位點(diǎn)，就結(jié)合并終止
準(zhǔn)確性高達(dá)99.999%
2##二代測(cè)序
第二代DNA測(cè)序技術(shù)(next generation sequencing，NGS )-循環(huán)陣列合成測(cè)序法。
主要特點(diǎn)高通量

Roche公司的454技術(shù)、illumina公司的Solexa/Hiseq技術(shù)和ABI公司的SOLID技術(shù)標(biāo)志第二代測(cè)序技術(shù)誕生
Illumina：Hiseq（Pair End雙端）
flowcell： 測(cè)序反應(yīng)的載體/容器，1個(gè)flowcell有8個(gè)lane
lane： 測(cè)序反應(yīng)的平行泳道，試劑添加、洗脫等過(guò)程的發(fā)生位置
雙端測(cè)序： 可能序列比較長(zhǎng)有四五百bp，兩邊各測(cè)120-150bp
flowcell構(gòu)造：一個(gè)lane包含兩列（swath），每一列有60個(gè)tile，每個(gè)tile會(huì)種下不同的cluster，每個(gè)tile在一次循環(huán)中會(huì)拍照4次（每個(gè)堿基一次）
第一步： 構(gòu)建DNA文庫(kù)
第二步： 上樣 【重點(diǎn)搞清楚lane上有哪兩種接頭，待測(cè)序列含有哪兩種接頭，這很重要！】
第三步：橋式PCR
第四步：測(cè)序

3##三代測(cè)序
　第三代測(cè)序技術(shù)以PacBio公司的SMRT和Oxford Nanopore Technologies 的納米孔單分子測(cè)序技術(shù)為標(biāo)志，不需要經(jīng)過(guò)PCR擴(kuò)增，超長(zhǎng)讀長(zhǎng)，可達(dá)二代測(cè)序的100倍以上，實(shí)現(xiàn)了對(duì)每一條DNA分子的單獨(dú)測(cè)序。錯(cuò)誤率比二代要高，達(dá)到10-15%。