實驗過程及方法：

1．通過系統(tǒng)發(fā)育樹先進(jìn)行保守基序分析，確定WAKL的功能區(qū)。

2．通過定量實時聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測了21個CsWAKL基因在CBC敏感品種萬金城和CBC抗性品種卡拉蒙定（接種后0~48h的表達(dá)。發(fā)現(xiàn)CsWAKL01和CsWAKL08在萬金橙中無明顯變化，在卡拉蒙定中持續(xù)上調(diào)，而CsWAKL20的表達(dá)譜正好相反。因此，推測CsWAKL基因可能是XCC抗性基因。

3. 為了探討CsWAKL08在抗病相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的作用，我們采用ABA、茉莉酸甲酯和水楊酸來誘導(dǎo)處理萬金橙和卡拉蒙定，并通過qRT-PCR分析CsWAKL08的表達(dá)結(jié)果。發(fā)現(xiàn)用ABA處理，兩種植物都無明顯變化；用茉莉酸甲酯處理，卡拉蒙定中CsWAKL08的表達(dá)上調(diào)，萬金橙中無明顯變化；用水楊酸處理，兩種植物中CsWAKL08的表達(dá)都上調(diào)。我們得出結(jié)論，在CBC抗性品種中，茉莉酸甲酯和水楊酸都能誘導(dǎo)CsWAKL08的表達(dá)，而在CBC敏感品種中CsWAKL08的表達(dá)可能是由外源基因誘導(dǎo)的，

4．為了確定CsWAKL08的亞細(xì)胞定位，用GFP融合蛋白分析，發(fā)現(xiàn)CsWAKL08定位于質(zhì)膜，在細(xì)胞外信號接收中發(fā)揮作用。

5．通過構(gòu)建了一個由CsWAKL08過表達(dá)的轉(zhuǎn)基因植物，與對照潰瘍病癥狀明顯減輕。

6．為了確定CsWAKL08在CBC敏感植物中的作用，用RNA干擾技術(shù)除去CsWAKL08，將得到的轉(zhuǎn)基因植物進(jìn)行定量實時聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）分析，發(fā)現(xiàn)去除CsWAKL08基因?qū)е赂涕贊儾「訃?yán)重。說明CsWAKL08對CBC抗性很重要。

7.為了研究CsWAKL08提高CBC抗性的機(jī)制，用商用試劑盒檢測了O2、h2o2的濃度。發(fā)現(xiàn)CBC抗性植株h2o2水平高，O2水平低，而CBC敏感植株正好相反。通過分析POD和SOD的活性，發(fā)現(xiàn)CsWAKL08高表達(dá)植物中POD和SOD的活性都增加，而RNA沉默植物中活性都下降。說明活性氧水平與XCC抗性有關(guān)，CsWAKL08高表達(dá)植株增強(qiáng)了XCC感染對抗氧化酶的誘導(dǎo)。

8.測量了轉(zhuǎn)基因和對照植株中SA和JA的含量。和誘導(dǎo)JA和SA生物合成的基因CsAOS和CsICS的轉(zhuǎn)錄水平。發(fā)現(xiàn)XCC感染后，XCC 抗性植物中JA含量升高，而XCC敏感植物中JA含量降低；SA無明顯變化。說明CsWAKL08對 JA的積累具有正向調(diào)節(jié)作用。

9.通過對JA反應(yīng)基因在這些轉(zhuǎn)基因植物中的表達(dá)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)JA的反應(yīng)基因在CsWAKL08高表達(dá)植株中上調(diào)，在沉默植物中下調(diào)，說明CsWAKL08可以通過調(diào)控JA依賴信號激活JA反應(yīng)來調(diào)控Xcc感染，從而賦予CBC抗性和耐受性。