操作環(huán)境:Win10 Ubuntu子系統(tǒng)
1. 下載參考轉(zhuǎn)錄組
下載傳送門(mén):http://ftp.ensembl.org/pub/release-76/fasta/homo_sapiens/cdna/Homo_sapiens.GRCh38.cdna.all.fa.gz
由于 wget 下載速度太慢,用了神奇的Motrix軟件分分鐘成功下載到本地。
就是來(lái)自技能樹(shù)推文的安利之一,推文傳送門(mén):https://mp.weixin.qq.com/s/whx-n1ktT58WHhWAUa06dw

就是它??

然后直接將 Homo_sapiens.GRCh38.cdna.all.fa.gz 拖到子系統(tǒng)的工作路徑下。
2. Salmon 構(gòu)建 index
假設(shè)已經(jīng)裝好了 Miniconda.
2.1 在小環(huán)境中安裝 Salmon
conda create --name rnaseq
conda activate rnaseq
conda install -y salmon
2.2 構(gòu)建 index
失敗第一回
salmon index -t Homo_sapiens.GRCh38.cdna.all.fa.gz -i homo38_index

[Error reading from the FASTA/Q stream. Make sure the file is valid.]
難道是文件不完整嗎,抱著這種想法甚至重新下載了1n遍。
失敗第二回
看了別人構(gòu)建好的 index, 里面有 .json 文件,難道是和網(wǎng)速有關(guān)?
開(kāi)著戰(zhàn)五渣的手機(jī)熱點(diǎn),依然 [Error reading from the FASTA/Q stream. Make sure the file is valid.] .
失敗最終回/成功第一回
查看文件詳細(xì)信息:
ls -lh

沒(méi)有權(quán)限,毫無(wú)權(quán)限。

那么就來(lái)修改權(quán)限???♂?
chmod 777 Homo_sapiens.GRCh38.cdna.all.fa.gz

這是墜吼的
salmon index -t Homo_sapiens.GRCh38.cdna.all.fa.gz -i homo38_index

所以構(gòu)建 index 秒失敗應(yīng)該反思哪里呢
- 文件完整性,有必要
- 網(wǎng)速,闊以,么得必要
- 文件權(quán)限,非常必要,尤其用了除
wget以外的騷操作下載
最后,向大家隆重推薦生信技能樹(shù)的一系列干貨!
- 生信技能樹(shù)全球公益巡講:https://mp.weixin.qq.com/s/E9ykuIbc-2Ja9HOY0bn_6g
- B站公益74小時(shí)生信工程師教學(xué)視頻合輯:https://mp.weixin.qq.com/s/IyFK7l_WBAiUgqQi8O7Hxw
- 招學(xué)徒:https://mp.weixin.qq.com/s/KgbilzXnFjbKKunuw7NVfw
