PCR實(shí)驗(yàn)里最怕出現(xiàn)什么問題？當(dāng)然是辛苦做出來的結(jié)果假陽性了。

當(dāng)PCR出現(xiàn)假陽性的時候，我們常常會考慮是不是引物/Mix/*等等污染模板，然后一一排查，勞心勞累費(fèi)時費(fèi)力，有時還是找不到原因，簡直要崩潰。

這里我覺得要延伸思考一下，這些試劑儀器到底為什么會被污染了呢？其實(shí)是核酸氣溶膠污染。?

離心機(jī)離心/劇烈地?fù)u動反應(yīng)管/PCR開蓋/吸樣時及移液器的反復(fù)吸樣等等，會產(chǎn)生空氣與液體表面摩擦的，都會產(chǎn)生核酸氣溶膠，也就是實(shí)驗(yàn)室里（或移液槍內(nèi)）彌漫著含有長短不一核酸片段的小水珠或小顆粒，這些小顆粒沉降（打到）到空白樣中導(dǎo)致最后擴(kuò)增出了條帶。

可想而知，這些核酸小液滴還會落到實(shí)驗(yàn)臺面/PCR儀/移液槍/*頭*盒子等等地方，如果我們不注意，這些核酸小液滴就會日積月累地積聚，這樣做實(shí)驗(yàn)就特別出現(xiàn)問題比如PCR假陽性。

那么我們平常做實(shí)驗(yàn)或者實(shí)驗(yàn)室管理上核酸氣溶膠（也就是核酸小液滴）產(chǎn)生了巨大的污染究竟該怎么辦呢？

大面積核酸污染清除操作方法：

（1）對污染區(qū)域使用核酸氣溶膠污染清除劑（PCR Cleaner）進(jìn)行大面積處理，包括：地板、墻面、天花板、門、窗戶等地方，同時加大通風(fēng)量（內(nèi)循環(huán)無用，盡可能外循環(huán)）；

（2）對污染區(qū)域內(nèi)的設(shè)備使用核酸氣溶膠污染清除劑（PCR Cleaner）進(jìn)行反復(fù)處理；對超凈臺等含有空氣過濾系統(tǒng)的設(shè)備，請更換過濾網(wǎng)；對移液器等污染設(shè)備采用核酸氣溶膠污染清除劑（PCR Cleaner）進(jìn)行清洗，高溫滅菌；

（3）待污染區(qū)域及設(shè)備器件清理完成后，使用紫外燈輻照4小時以上；

（4）可請保潔員按照上述要求（1）（2）（3）連續(xù)清理三天；

（5）設(shè)計實(shí)驗(yàn)對照組（根據(jù)污染源基因片段），進(jìn)行陰陽對照實(shí)驗(yàn)，根據(jù)陰性對照確認(rèn)污染情況，可采用8連排PCR管（2個陽參+6個陰參）；若陽參起跳，陰參起跳，則污染需要繼續(xù)清理；若陽參起跳，陰參全部不起跳了，則說明污染等到控制，可恢復(fù)正常實(shí)驗(yàn)；

核酸氣溶膠污染清除劑（PCR Cleaner）一盒500 mL；10平米的房間需要2盒可完成覆蓋；其他設(shè)備及器件根據(jù)情況進(jìn)行采購；

大面積核酸氣溶膠污染非常難以清除，若不立即采取清理，污染會更加牢固，長期釋放污染核酸，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室停工。