PCR: polymerase chain reaction
待擴(kuò)增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應(yīng)混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。這種熱變性-復(fù)性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán)。
PCR實(shí)驗(yàn)常用Taq酶，但有的實(shí)驗(yàn)需要保真度更高的一些酶。高保真的一個通用標(biāo)準(zhǔn)是錯配率，錯配率越低保真性越好。普通Taq酶的錯配率在10-5堿基/循環(huán)數(shù)，而高保真Taq酶錯配率可降到10-6，大大降低了出錯的可能性，適合對PCR保真性要求較高的實(shí)驗(yàn)，如基因篩選，測序，突變檢測等。高保真Taq酶的保真原理是：高保真Taq酶具有3‘-5‘核酸外切酶活性， PCR擴(kuò)增中如果產(chǎn)生錯配堿基，它可以將其切掉，但是也正因?yàn)槿绱?，往往擴(kuò)增效率低一些，而且不宜用TA法克隆。
