H-SY5Y細(xì)胞拿到后出現(xiàn)皺縮、聚團(tuán)、脫落怎么處理?
您好，問(wèn)下SH-SY5Y細(xì)胞拿到后出現(xiàn)皺縮、聚團(tuán)、脫落該怎么處理好?
【參考方法】
SH-SY5Y細(xì)胞出現(xiàn)皺縮
常溫細(xì)胞拿到后，把細(xì)胞放進(jìn)培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)即可。
如果4小時(shí)后細(xì)胞仍然沒(méi)有鋪展開(kāi)，密度適中的前提下可以放培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜(過(guò)夜前倒出部分培養(yǎng)基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松)。
SH-SY5Y細(xì)胞拿到時(shí)出現(xiàn)聚團(tuán)
常溫細(xì)胞拿到后，先把細(xì)胞放進(jìn)培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)以穩(wěn)定狀態(tài)，再進(jìn)行傳代。
傳代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。
SH-SY5Y細(xì)胞拿到時(shí)出現(xiàn)脫落
常溫細(xì)胞拿到后，先把細(xì)胞放進(jìn)培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)以穩(wěn)定狀態(tài)再處理。
脫落后的細(xì)胞通常聚團(tuán)漂浮，通過(guò)離心將漂浮的細(xì)胞團(tuán)收集起來(lái)，在離心管里進(jìn)行胰酶消化后重新鋪板即可。
貼壁細(xì)胞常規(guī)方法消化下來(lái)，和處理好的脫落細(xì)胞合并，混勻后鋪板。
脫落處理
1.1200rpm(約250g)3min離心收集SH-SY5Y細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)基;
2.PBS 重懸SH-SY5Y細(xì)胞，再次 1200rpm(約250g)3min離心，去除PBS;
3.加入 1mL 左右 0.25%胰酶重懸細(xì)胞，吹打1-2下吹起沉淀即可;
4.放入培養(yǎng)箱約 1-3min;
5.用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液，使SH-SY5Y細(xì)胞團(tuán)分散;
6.迅速加入 3-5mL 含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化;
7.1200rpm(約250g)3min離心，去除胰酶;
8.加入新鮮培養(yǎng)基按合適比例接入無(wú)菌培養(yǎng)器皿中。
