一、物品準(zhǔn)備：

1、抗凝取血管

2、2%臺盼藍(lán)溶液，1克臺盼藍(lán)配5ml純水。

3、HBSS緩沖液、1083

4、EBM培養(yǎng)基，加入生長因子+10%FBS。

5、細(xì)胞記數(shù)板、電腦

6、離心機(jī)設(shè)置緩慢減速

7、房間紫外滅菌

二、取血（動物房）

1、兔子耳中動脈取血10ml,抗凝管每管2ml。

三、分離單核細(xì)胞（5810R房間）

1、HBSS稀釋血液（可用可不用）

2、15ml管每管添加3ml1083，再再表面緩慢加入3ml血液，400Xg(rcf)30min離心。

3、用槍頭緩慢吸出單核細(xì)胞，勿貪多。

四、接種細(xì)胞（細(xì)胞房）

1、培養(yǎng)皿提前1-2h用FN包被，有木有特異性？

2、用PBS清洗細(xì)胞，2-3次，1000轉(zhuǎn)5min。

3、種板，3ml吹打細(xì)胞，6孔板，每孔2ml。

4、臺盼藍(lán)染色觀察細(xì)胞活力，未染色細(xì)胞>95%。

5、觀察細(xì)胞：鋪路石樣細(xì)胞，程團(tuán)塊狀。

圖片發(fā)自簡書App

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