轉(zhuǎn)錄組入門(mén)學(xué)習(xí)(二)

線下課程回顧

1. 生物信息概述

1.1 生物信息所需技能
1.2 入門(mén)生物信息的方法

2. 數(shù)據(jù)如何產(chǎn)生

2.1常見(jiàn)測(cè)序平臺(tái)和測(cè)序類型

  • 測(cè)什么決定怎么測(cè)
  • 干什么決定測(cè)多深

2.2. 測(cè)序基本原理

  • single end
  • pair end
  • mate pair
  • 鏈特異性測(cè)序

2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

3. 數(shù)據(jù)如何處理

3.1 數(shù)據(jù)預(yù)處理

  • 原始數(shù)據(jù)誤差的來(lái)源
  • 質(zhì)量控制FastQC結(jié)果解讀
  • 數(shù)據(jù)過(guò)濾 Trimmomatic 原理和使用方法

3.2 有參轉(zhuǎn)錄組序列比對(duì)

  • 不同比對(duì)軟件的比較
  • 常用的序列比對(duì)算法
  • 基因組
    • STAR
    • hisat2
  • 轉(zhuǎn)錄本:RSEM
  • 實(shí)例結(jié)果解讀
  • 序列比對(duì)常見(jiàn)問(wèn)題

3.3 無(wú)參轉(zhuǎn)錄組

  • 轉(zhuǎn)錄本從頭拼接原理
  • 拼接方法 Trinity

3.4 表達(dá)定量

  • RNA-seq 常用統(tǒng)計(jì)定量單位
  • 基因組比對(duì):Htseq-Count, FeatureCount
  • 轉(zhuǎn)錄本比對(duì):RSEM
  • 無(wú)比對(duì)快速定量:kallisto

4. 數(shù)據(jù)如何分析

4.1 數(shù)據(jù)分析的思路

4.2 差異表達(dá)

  • Deseq 標(biāo)準(zhǔn)化原理
  • 結(jié)果解讀

4.3 富集分析

  • GO常用網(wǎng)站和工具
  • 通路富集分析

4.4 數(shù)據(jù)可視化展示

  • IGV(本地機(jī))
  • 基因?yàn)g覽器(網(wǎng)上)
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