測(cè)序原理
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Dna測(cè)序技術(shù)的發(fā)展
DNA測(cè)序技術(shù)的發(fā)展
第一代測(cè)序技術(shù)-Sanger法測(cè)序原理
雙脫氧核苷酸三磷酸(ddNTP):
這種核苷酸缺少在兩個(gè)核苷酸之間形成磷酸二酯鍵所需的3'- OH基團(tuán),當(dāng)摻入ddNTP時(shí),導(dǎo)致DNA聚合酶停止DNA的延伸。因此可以對(duì)ddNTP進(jìn)行放射性標(biāo)記或熒光標(biāo)記,通過(guò)CCD相機(jī)捕獲信號(hào)來(lái)判讀堿基種類(lèi)。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
推文詳解

1.四個(gè)試劑盒有充足的脫氧核糖核苷酸(dNTP)和四個(gè)雙脫氧核苷酸(ddNTP)之一

2.堿基配對(duì)時(shí)有兩個(gè)選擇,一個(gè)是dNTP,另一個(gè)是ddNTP,當(dāng)選擇與ddNTP配對(duì)的時(shí)候,堿基互補(bǔ)中止,由此可以確定某個(gè)堿基的位置

3.通過(guò)毛細(xì)管電泳和CCD相機(jī)捕獲熒光信號(hào)來(lái)讀出DNA序列
第二代測(cè)序-大規(guī)模平行測(cè)序
第三代測(cè)序-單分子測(cè)序技術(shù)

三代測(cè)序比較
思維導(dǎo)圖整理

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