淀粉樣β（淀粉樣β）42寡聚被認(rèn)為是阿爾茨海默病（AD）的早期事件。Irie等人通過(guò)系統(tǒng)脯氨酸掃描和固態(tài)核磁共振研究提出了他們的假設(shè)，即淀粉樣β42聚集時(shí)在22和23位具有轉(zhuǎn)彎結(jié)構(gòu)的淀粉樣β構(gòu)象具有很高的毒性，也容易形成寡聚體。1）人們認(rèn)為，有毒的淀粉樣貝塔構(gòu)象是穩(wěn)定的，很容易形成神經(jīng)毒性寡聚物。該抗體（克隆：24B3）特異性檢測(cè)有毒的淀粉樣蛋白β構(gòu)象，用于開(kāi)發(fā)ELISA檢測(cè)試劑盒。2）該試劑盒可以選擇性地測(cè)量腦脊液中推測(cè)的淀粉樣肽β低聚物。

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艾美捷IBL-人β淀粉樣蛋白毒性寡聚物檢測(cè)試劑盒：

貨號(hào)：27709-96Well

預(yù)期用途：研究用試劑

檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

標(biāo)記物：辣根過(guò)氧化物酶（HRP）

適用物種：人類

檢測(cè)樣本類型：腦脊液（CSF）

檢測(cè)范圍：3.13 ~ 200 pg/mL

第一步反應(yīng)條件：2 - 8?℃ 孵育過(guò)夜

第二步反應(yīng)條件：2 - 8?℃ 孵育60分鐘

靈敏度：0.27 pg/mL

化合物交叉反應(yīng)性如下：

人?Aβ?(1-40)：≦0.1%

人?Aβ?(1-42)：≦0.1%

儲(chǔ)存條件：2 - 8?℃

檢測(cè)服務(wù)：可提供

包裝規(guī)格：96孔板 ×?1

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試劑盒組成：

1.?預(yù)包被板：（抗人Aβ（N）（82E1）小鼠IgG抗體）96孔 ×?1 ?

2.?標(biāo)記抗體濃縮液：（30×）HRP標(biāo)記抗AβE22P 24B3小鼠IgG Fab’?0.4 mL?×?1 ?

3.?標(biāo)準(zhǔn)品：（E22P-Aβ40二聚體）0.5 mL?×?2 ?

4. EIA緩沖液?30 mL?×?1 ?

5.?標(biāo)記抗體稀釋液?12 mL?×?1 ?

6.?顯色底物：TMB溶液?15 mL?×?1 ?

7.?終止液?12 mL?×?1 ?

8.?洗滌緩沖液濃縮液?50 mL?×?1 ?

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檢測(cè)原理：

本試劑盒采用固相夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。預(yù)包被板上固定有捕獲抗體，樣本和標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中進(jìn)行第一步反應(yīng)。反應(yīng)后，加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行第二步反應(yīng)。洗滌去除未結(jié)合的抗體后，加入四甲基聯(lián)苯胺（TMB）顯色底物，顯色強(qiáng)度與目標(biāo)分子的含量成正比。

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操作注意事項(xiàng)：

1.?樣本應(yīng)在采集后盡快檢測(cè)。如需儲(chǔ)存，請(qǐng)冷凍保存，避免反復(fù)凍融。解凍時(shí)應(yīng)在低溫下進(jìn)行，并在檢測(cè)前充分混勻。 ?

2.?樣本應(yīng)使用本試劑盒中的“4號(hào)?EIA緩沖液”進(jìn)行稀釋。 ?

3.?建議對(duì)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)。 ?

4.?每次實(shí)驗(yàn)都應(yīng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 ?

5.?樣本應(yīng)保持在中性pH范圍內(nèi)，有機(jī)溶劑的污染可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。 ?

6.?所有試劑在使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫，并輕輕充分混勻?；靹蚝笳?qǐng)確認(rèn)試劑質(zhì)量無(wú)變化。 ?

7.?洗滌預(yù)包被板時(shí)，請(qǐng)僅使用本試劑盒提供的“8號(hào) 洗滌緩沖液濃縮液”。洗滌不充分可能導(dǎo)致檢測(cè)失敗。 ?

8.?若使用洗瓶，請(qǐng)將洗滌緩沖液注滿每個(gè)孔，倒置板子并輕輕甩動(dòng)，確保液體完全排出。請(qǐng)按說(shuō)明書(shū)重復(fù)洗滌步驟，避免洗滌不徹底。 ?

9.?去除洗滌緩沖液后，請(qǐng)將板子輕叩在干凈的紙巾上，確保孔內(nèi)液體完全去除，注意紙巾不要接觸孔內(nèi)壁。 ?

10.?“6號(hào) 顯色底物（TMB溶液）”對(duì)光敏感，應(yīng)避光保存，并避免與金屬接觸。每次使用時(shí)應(yīng)按需取量，放入干凈的容器中。 ?

11.?加入TMB溶液后，孔內(nèi)液體逐漸變?yōu)樗{(lán)色。在此過(guò)程中，板子應(yīng)避光保存。收集容器中剩余的TMB溶液不得倒回原瓶，以免污染。 ?

12.?加入“7號(hào) 終止液”后，應(yīng)在30分鐘內(nèi)完成吸光度（O.D.）測(cè)定。

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檢測(cè)結(jié)果計(jì)算方法：

1.?以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫軸，吸光度（O.D.）為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?？墒褂眠m當(dāng)?shù)幕貧w曲線（如雙對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換的二次回歸）擬合各點(diǎn)。 ?

2.?根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，讀取待測(cè)樣本的吸光度對(duì)應(yīng)的濃度值。 ?

3.?將讀取的濃度值乘以樣本的稀釋倍數(shù)，計(jì)算最終濃度。