1. 簡(jiǎn)介
研究蛋白質(zhì)之間的相互作用是當(dāng)前蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的一個(gè)熱點(diǎn)，常見的研究方法有以下多種：
其中酵母雙雜交技術(shù)作為發(fā)現(xiàn)和研究在活細(xì)胞體內(nèi)的蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用的技術(shù)平臺(tái)，在近幾年來得到了廣泛運(yùn)用。
酵母雙雜交系統(tǒng)是在真核模式生物酵母中進(jìn)行的，研究活細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)相互作用，對(duì)蛋白質(zhì)之間微弱的、瞬間的作用也能夠通過報(bào)告基因的表達(dá)產(chǎn)物敏感地檢測(cè)得到，它是一種具有很高靈敏度的研究蛋白質(zhì)之間關(guān)系的技術(shù)。
酵母作為報(bào)告菌株還有以下好處
酵母的轉(zhuǎn)化比較容易，已有的轉(zhuǎn)化方法，如LiAc轉(zhuǎn)化法，能將轉(zhuǎn)化效率穩(wěn)定在10^4 － 10^5/ug
酵母能同時(shí)容納兩種以上的質(zhì)粒，從酵母中提取質(zhì)粒也比較方便
酵母含有可直接進(jìn)行選擇的標(biāo)記基因和特征性的報(bào)告基因，如LacZ之類簡(jiǎn)單明了的報(bào)告基因，通過顏色反應(yīng)即可驗(yàn)證
酵母雙雜交技術(shù)既可以用來研究哺乳動(dòng)物基因組編碼的蛋白質(zhì)之間的互作，也可以用來研究高等植物基因組編碼的蛋白質(zhì)之間的互作。
因此，酵母雙雜交技術(shù)在許多的研究領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。
2. 原理
酵母雙雜交系統(tǒng)的建立是基于對(duì)真核生物調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始過程的認(rèn)識(shí)。細(xì)胞起始基因轉(zhuǎn)錄需要有反式轉(zhuǎn)錄激活因子的參與。反式轉(zhuǎn)錄激活因子，例如酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4在結(jié)構(gòu)上是組件式的（modular），往往由兩個(gè)或兩個(gè)以上結(jié)構(gòu)上可以分開，功能上相互獨(dú)立的結(jié)構(gòu)域（domain）構(gòu)成，其中有DNA結(jié)合功能域和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域。這兩個(gè)結(jié)合域?qū)⑺鼈兎珠_時(shí)仍分別具有功能，但不能激活轉(zhuǎn)錄，只有當(dāng)被分開的兩者通過適當(dāng)?shù)耐緩皆诳臻g上較為接近時(shí)，才能重新呈現(xiàn)完整的GAL4轉(zhuǎn)錄因子活性，并可激活上游激活序列的下游啟動(dòng)子，使啟動(dòng)子下游基因得到轉(zhuǎn)錄。
3. 步驟
