ALGORITHMS FOR HER2 TESTING

IHC：檢測蛋白質(zhì)的過度表達

ISH：檢測基因擴增狀態(tài)

推薦的HER2評分方法

注意1+和2+的區(qū)別:

1+:faint/barely perceptible or weak incomplete 薄膜粘連在>10%細胞上

2+：弱的/溫和的完全的薄膜粘連在>10%或者強壯的完全的在<10%上的粘連

3+注意：

Membrane staining must?be intense and uniform and resemble?chicken-wire. Ignore incomplete or?pale membrane staining in the?percentage estimation.

乳腺癌HER2檢測指南

組織標本的制備

1．標本類型：(1)手術切除標本；(2)粗針穿刺活檢標本；(3)麥默通活檢標本。

2．標本固定：所有乳腺癌標本離體后都應盡快固定(1 h內(nèi))。固定時應將標本每隔5～10 mm切開，并可在組織間嵌入紗布或濾紙等物。固定液量與所浸泡組織的比例應足夠。固定時間以6—72 h為宜。

3．固定液類型：4％中性(磷酸緩沖)甲醛固定液。

4．組織切片：(1)未染色的切片置于室溫不宜超過6周，以防抗原丟失。(2)用于IHC染色者切片厚度以3～5μm為宜，ISH法以4—5μm為宜。(3)完成檢測的切片，IHC和亮視野ISH可按常規(guī)長期保存，F(xiàn)ISH結果應立即照相存檔并于一20℃保存，建議至少保存3個月備查。(4)各種檢測方法均應有HE染色切片作為對照。

IHC

1．觀察程序：應先在低倍鏡下觀察整張切片，判斷染色是否滿意及是否存在HER2表達的異質(zhì)性。正常乳腺上皮不應出現(xiàn)強的細胞膜著色。只評定浸潤癌的著色情況，導管原位癌的著色不能作為評定對象。觀察細胞膜著色的浸潤癌細胞的比例及著色強度，若出現(xiàn)細胞質(zhì)或細胞核著色提示IHC染色效果不理想或組織處理不佳，建議調(diào)整染色條件或更換組織后再行染色。判讀時應避開組織邊緣及組織處理不佳(如明顯擠壓)的癌組織。

2．結果判讀及注意事項：結果判讀標準(按每張切片計；圖1，2)：0：無染色或≤10％的浸潤癌細胞呈現(xiàn)不完整的、微弱的細胞膜染色；1+：>10％的浸潤癌細胞呈現(xiàn)不完整的、微弱的細胞膜染色；2+：有兩種情況，第一種為>10％的浸潤癌細胞呈現(xiàn)不完整和／或弱至中等強度的細胞膜染色，第二種為≤10％的浸潤癌細胞呈現(xiàn)強而完整的細胞膜染色；3+：>10％的浸潤癌細胞呈現(xiàn)強而完整的細胞膜染色。對于2+的病例，應該用ISH做進一步檢測，也可以選取不同的組織塊重新檢測或送條件更好的中心實驗室進行檢測。當出現(xiàn)下列情況時HER2狀態(tài)為無法判讀(indeterminate)，包括標本處理不當、嚴重的組織擠壓或邊緣效應、檢測失敗等。應在報告中注明HER2狀態(tài)無法判讀的可能原因，并建議再次獲取樣本進行HER2檢測。在乳腺浸潤性微乳頭狀癌和部分有分泌現(xiàn)象的乳腺癌中，有時浸潤癌細胞的細胞膜已呈很深的棕褐色，但卻并未呈閉環(huán)狀完整著色，存在一定程度的不連續(xù)性和間斷勝，此時至少應視為HER2 2+，并需要行ISH檢測進一步明確HER2狀態(tài)。建議在HER2 IHC檢測報告中包括如下內(nèi)容：患者信息(包括姓名、性別、年齡、門診／住院號)、送檢醫(yī)師姓名、送檢日期、標本信息(包括病理號和蠟塊號)、標本部位和類型、抗體信息(克隆號／生產(chǎn)商)、檢測方法、是否使用圖像分析、對照設置情況、樣本量是否適合評估、判讀結果(O、1+、2+、3+)、檢測結論(如陽性、不確定、陰性、無法判讀)。