分子生物學基礎概念

  • 轉錄因子Transcription Factors, TFs:是指能夠以序列特異性方式結合DNA并且調節(jié)轉錄的蛋白質。
  • motif:轉錄因子與特異性DNA結合通常概括為“基序”(motif)!

下圖展示:

  • 啟動子、終止子


    核心啟動子結構.png
  • 起始密碼子、終止密碼子

  • UTR、CDS、polyA

DNA-RNA結構.png

中心法則圖解

Gene_structure_eukaryote_2_annotated.svg.png

常見的真核和原核表達系統(tǒng)的啟動子(promoters)

CAG啟動子

人們認識到CMV啟動子的不足后,通過將不同物種的啟動子“復制粘貼”到一起,構建了一系列人工啟動子,比如所CAG、CBA等等啟動子。CAG啟動子包含CMV病毒啟動子的增強子序列,雞β-actin的啟動子以及兔β-Globin的剪接受體,如圖4。

image

圖4. CAG啟動子?

分析來看,CAG啟動子保留了CMV病毒的增強子,因此轉錄能力與CMV啟動子不相上下,雞β-actin啟動子則為它提供了更加廣泛的表達譜,因此CAG啟動子可以用于大多數(shù)基因編輯策略。舉個栗子,mT/mG小鼠就是通過CAG啟動子驅動ACTB-tdTomato.-EGFP在膜上表達,無Cre重組酶時表達tdTomato,有Cre重組酶時表達GFP,指示Cre鼠的特異性。

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