一、什么是反轉(zhuǎn)錄？

反轉(zhuǎn)錄:
是指以RNA為模板合成DNA的過程。反轉(zhuǎn)錄是天然就存在的。
反轉(zhuǎn)錄的意義：
保證所有RNA病毒能夠?qū)⑦z傳物質(zhì)穩(wěn)定地遺傳給下一代。

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二、反轉(zhuǎn)錄的過程：

以mRNA為模板，首先在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，合成與mRNA互補的DNA鏈（這種DNA有一個專門的稱呼，叫互補DNA，簡稱cDNA），cDNA第一條鏈合成之后，mRNA被降解，DNA聚合酶又會以cDNA第一條鏈為模板，合成cDNA第二條鏈，這樣就得到了雙鏈cDNA分子。

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三、cDNA與基因組DNA的區(qū)別：

• 因為cDNA來自于mRNA的復(fù)印，所以堿基序列信息跟mRNA完全相同；也就是缺少了內(nèi)含子，5'端加了帽子，3'端加了尾巴；
• cDNA其實是真核生物基因的截短形式，是真核基因的核心表達序列。

四、擴增繁殖：

** 目的基因與載體連接的重組子都要先被導(dǎo)入細菌細胞進行克隆。**

五、克隆的目的：

1.檢測目的基因與載體是否已經(jīng)連接上以及是否連接正確；
2.得到較多的目的基因拷貝以備后面使用；
3.檢測目的基因能否在原核細胞中表達。