歐洲科學(xué)家在實(shí)驗(yàn)室重組出新冠病毒

新京報(bào)快訊（記者 李玉坤）一批歐洲科學(xué)家利用反向遺傳學(xué)技術(shù)在實(shí)驗(yàn)室重組出新冠病毒。

生物學(xué)論文預(yù)發(fā)布平臺(tái)BioRxiv1月21日發(fā)表一篇名為Rapid reconstruction of SARS-CoV-2 using a synthetic genomics platform（利用合成基因組學(xué)平臺(tái)快速重建新冠病毒）的論文手稿，論文的作者來自瑞士伯爾尼的病毒學(xué)和免疫學(xué)研究所、伯爾尼大學(xué)，以及德國、俄羅斯的科研機(jī)構(gòu)。

論文首先證明了基于酵母的合成基因組學(xué)平臺(tái)的完整功能，可用于多種RNA病毒的基因重建，比如，可以重組冠狀病毒科，黃病毒科和副粘病毒科的病毒。論文作者表示，反向遺傳學(xué)已經(jīng)成為必不可少的工具，它徹底改變了人們對(duì)病毒發(fā)病機(jī)理和疫苗開發(fā)的理解。大型RNA病毒基因組（例如冠狀病毒），由于大小和偶爾的不穩(wěn)定的原因，很難在大腸桿菌宿主中進(jìn)行克隆和操縱，盡管大腸桿菌確實(shí)證明了對(duì)克隆許多病毒基因組非常有用，但就組裝和穩(wěn)定地維持包括冠狀病毒在內(nèi)的許多RNA病毒均有缺陷。

為了驗(yàn)證合成基因組學(xué)平臺(tái)是否可以應(yīng)用于其他冠狀病毒，論文作者先用了MERS病毒進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，證明合成基因組學(xué)平臺(tái)適合基因修飾冠狀病毒基因組，但合成的MERS病毒與細(xì)胞培養(yǎng)的相比，復(fù)制能力有所降低。

他們將新冠病毒的基因組分割成12個(gè)亞基因組片段，大小在0.5-3.4kbp（千堿基對(duì)）之間，同時(shí)，他們還希望能制造一種表達(dá)GFP（綠色熒光蛋白）的新冠病毒，能夠在細(xì)胞培養(yǎng)中檢測(cè)，并促進(jìn)血清學(xué)診斷的建立。結(jié)果證明，在克隆新冠病毒方面，他們的克隆系統(tǒng)比大腸桿菌系統(tǒng)更有效，因?yàn)榇竽c桿菌系統(tǒng)在復(fù)制其中2個(gè)片段的時(shí)候有問題?；谠撈脚_(tái)，他們?cè)谑盏胶铣蒁NA片段后僅一周的時(shí)間內(nèi)，就對(duì)最近流行的新冠病毒進(jìn)行克隆和復(fù)活。

作者表示，如果有了新冠病毒毒株，可以建立血清學(xué)診斷，開發(fā)和評(píng)估抗病毒劑和疫苗以及建立適當(dāng)?shù)捏w內(nèi)模型，這是疫情當(dāng)下迫切需要的?；瘜W(xué)合成方法DNA產(chǎn)生的毒株可以繞開病毒毒株的供應(yīng)限制，還可以對(duì)單個(gè)基因進(jìn)行遺傳修飾和功能表征。在新冠病毒第一個(gè)基因組序列發(fā)布時(shí)（2020年1月10/11日），尚未有病毒分離株，直到1月底，澳大利亞的科學(xué)家分離出了新冠病毒毒株。他們的這種方法可以成為向衛(wèi)生部門和實(shí)驗(yàn)室提供傳染性病毒毒株的替代方法，無需獲取臨床樣本。

新京報(bào)記者了解到，1月27日，廣東省疾病預(yù)防控制中心就成功分離出廣東省第一株新型冠狀病毒毒株，近日，安徽省疾病預(yù)防控制中心應(yīng)用宏轉(zhuǎn)錄組基因測(cè)序新冠肺炎病例樣本，順利分離到2株新冠病毒毒株，這是繼廣東、上海、浙江、北京、湖北之后，第六家分離出新冠病毒毒株的省級(jí)疾控中心。