轉(zhuǎn)錄組是一類(lèi)讓人既愛(ài)又恨的項(xiàng)目,實(shí)驗(yàn)門(mén)檻低,卻是文章泛濫的重災(zāi)區(qū),總有人問(wèn)小編,現(xiàn)在轉(zhuǎn)錄組還能發(fā)文章嗎?下面小編就借一篇2020年5月4日發(fā)表在BMC Genomics上題為:Transcriptome analysis reveals rapid defence responses in wheat induced by phytotoxic aphid Schizaphis graminum feeding 的文章,詳細(xì)地論述下2020年轉(zhuǎn)錄組文章到底有多難發(fā)?怎么發(fā)?下面我們先看下這篇文章具體內(nèi)容:實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介:文章研究的是小麥幼苗在麥二叉蚜采食后的快速防衛(wèi)反應(yīng),分別于采食2、6、12、24、48 h后取幼苗葉片(3次生物學(xué)重復(fù)),進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、葉綠素測(cè)定以及H2O2 積累測(cè)定以及NADPH抑制劑處理進(jìn)一步探究小麥在咬食后氧迸發(fā)防御機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
1.?麥二叉蚜采食后小麥轉(zhuǎn)錄組分析這部分結(jié)果展示比較套路,主要是通過(guò)PCA分析看了下樣品相關(guān)性及處理效應(yīng),介紹了一下差異基因總體情況。如下圖:

2. 差異基因GO分析作者按上調(diào)/下調(diào)基因集分別進(jìn)行GO注釋?zhuān)磿r(shí)間點(diǎn)分別論述上調(diào)/下調(diào)基因集富集情況,如下圖:

3.?麥二叉蚜采食后小麥葉片葉綠素含量變化從差異基因GO分析可以看出,蚜蟲(chóng)采食可以負(fù)向調(diào)控小麥的光合作用過(guò)程、光捕獲和光系統(tǒng)相關(guān)基因,所以作者又測(cè)定了采食后小麥葉片葉綠素含量變化,如下圖:

4.?麥二叉蚜采食后小麥葉片中水楊酸、茉莉酸相關(guān)防御途徑的基因表達(dá)參與SA生物合成的苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因在不同時(shí)間點(diǎn)均顯著上調(diào),但表達(dá)水平隨采食時(shí)間的增加而逐漸降低;茉莉酸代謝途徑中三種脂氧合酶(LOX)基因均顯著上調(diào);受MAPKs調(diào)控的WRKY轉(zhuǎn)錄因子也顯示上調(diào),如下圖:

5.?二叉蚜采食后小麥葉片中過(guò)氧化氫(H2O2)積累和抗氧化酶活性的變化蚜蟲(chóng)采食明顯上調(diào)活性氧清除基因的表達(dá),進(jìn)一步通過(guò)3,3 ' -二氨基聯(lián)苯胺(DAB)對(duì)小麥小麥葉片進(jìn)行細(xì)胞學(xué)染色,采食2h后就出現(xiàn)H2O2積累,并且隨采食時(shí)間的延長(zhǎng),斑點(diǎn)數(shù)量和大小逐漸增加,如下圖:



6. NADPH氧化酶抑制對(duì)小麥葉片H2O2積累和防御反應(yīng)的影響NADPH氧化酶抑制劑二苯碘銨(DPI)不僅能明顯抑制由采食引起的氧迸發(fā),并且對(duì)小麥葉片防御應(yīng)答基因表達(dá)水平也有明顯的下調(diào)作用。


以上就是該篇文章全部結(jié)果,回頭來(lái)看,這個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并不復(fù)雜,內(nèi)容也不是過(guò)多,為啥人家能發(fā)表而你卻被拒稿呢?要知道,就這個(gè)2區(qū)3.5分影響因子的BMC Genomics ,也是很多人渴望而不可得的存在。
2020年,轉(zhuǎn)錄組類(lèi)文章到底有多難發(fā)?從這篇文章我們可以看到,文章并沒(méi)有你想像中的難發(fā),我試著從中提煉以下幾點(diǎn),希望對(duì)您有所借鑒。
1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)相對(duì)合理,層級(jí)遞進(jìn),取樣點(diǎn)與植物防衛(wèi)三級(jí)級(jí)聯(lián)反應(yīng)基本對(duì)應(yīng),后續(xù)分析論述層次較為分明。
2. 轉(zhuǎn)錄組僅是的實(shí)驗(yàn)中的一部分,套路式的羅列結(jié)果的時(shí)代已沒(méi)過(guò)去了,將轉(zhuǎn)錄組與其他指標(biāo)融合在一起,就像本文中,除了轉(zhuǎn)錄組,作者還進(jìn)一步進(jìn)行了生理指標(biāo)測(cè)定,如葉綠素含量、氧迸發(fā)等,基因關(guān)聯(lián)性狀,使結(jié)果更有說(shuō)服力。
3. 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)介紹切忌空泛,要結(jié)合其他生理生化指標(biāo),提煉出某些相關(guān)基因加以展示,如本文中葉綠素含量與表達(dá)下調(diào)的光捕獲、光和作用相關(guān)的基因;H2O2積累和抗氧化酶活性的變化等。
4. 論文精華都在討論部分,多引用他人數(shù)據(jù)佐證自己的結(jié)果,能做到旁征博引,論文一般都錯(cuò)不了!精讀文獻(xiàn)原文,請(qǐng)點(diǎn)擊文末“閱讀原文” 直達(dá)。
2020年,轉(zhuǎn)錄組類(lèi)文章有多難發(fā)?其實(shí)難的是你不肯轉(zhuǎn)變觀念,時(shí)代不同了,老套路也就過(guò)時(shí)了;很多老師目前面對(duì)的難題不是手里沒(méi)數(shù)據(jù),也不是不會(huì)寫(xiě)論文,而是數(shù)據(jù)看不明白,分析便無(wú)從下手,這個(gè)梗不破,怎么發(fā)文章?!我給大家推薦一部《轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果解讀》視頻教程,輕松解決您看不懂轉(zhuǎn)錄組結(jié)果數(shù)據(jù)的難題。
有參轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果的解讀
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無(wú)參轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果的解讀
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8.其他課程鏈接:二代測(cè)序轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)自主分析、NCBI數(shù)據(jù)上傳、二代測(cè)序數(shù)據(jù)解讀。