上個(gè)月,一個(gè)做神經(jīng)科學(xué)的朋友給我打電話,語氣里帶著明顯的疲憊。他說他們實(shí)驗(yàn)室之前委托一家公司做兔抗,合同簽了,錢付了,等了將近三個(gè)月,結(jié)果收到的抗體一驗(yàn)證,WB出來七八條帶,...
上個(gè)月,一個(gè)做神經(jīng)科學(xué)的朋友給我打電話,語氣里帶著明顯的疲憊。他說他們實(shí)驗(yàn)室之前委托一家公司做兔抗,合同簽了,錢付了,等了將近三個(gè)月,結(jié)果收到的抗體一驗(yàn)證,WB出來七八條帶,...
有一回跟一個(gè)做腫瘤免疫的朋友吃飯,聊著聊著就說到他們實(shí)驗(yàn)室最近的日子不太好過。 項(xiàng)目申請(qǐng)?jiān)絹碓诫y,經(jīng)費(fèi)卡得越來越緊,連買耗材都要精打細(xì)算。他說去年還能放開手腳買進(jìn)口抗體,今年...
在實(shí)驗(yàn)室待久了,你大概也見過這樣的場(chǎng)景:動(dòng)物房門口,一個(gè)師兄蹲在地上,對(duì)著籠子里的兔子自言自語。不是因?yàn)樗陋?dú),而是那只編號(hào)“R-07”的新西蘭大白兔,已經(jīng)挨了第五針,可采出...
下午三點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)室,小陳對(duì)著那幾管血清發(fā)呆。這是他養(yǎng)了四個(gè)月的兔子,免疫、采血、純化,每一步都小心翼翼??勺罱K收下來的抗體,算來算去,夠做兩批WB就沒了。實(shí)驗(yàn)還要往下走,樣品還...
實(shí)驗(yàn)室里最磨人的事,排第一的恐怕不是實(shí)驗(yàn)失敗,而是——抗體效價(jià)又沒達(dá)標(biāo)。 你算算這個(gè)時(shí)間:兔子免疫,第一次等兩周,測(cè)效價(jià),不夠;再加強(qiáng)免疫,又等兩周,再測(cè),勉強(qiáng)接近閾值;再來...
做Western Blot的人,大概都經(jīng)歷過那種讓人抓狂的時(shí)刻。 內(nèi)參,這個(gè)本該老老實(shí)實(shí)待在那兒、每孔上樣量一致就乖乖呈現(xiàn)均勻條帶的東西,突然開始跟你作對(duì)。今天β-actin...
實(shí)驗(yàn)室的椅子上仿佛長了刺。你已經(jīng)記不清這是第幾次,在顯影儀前屏住呼吸,等待那張膜露出它的“底牌”。然而,當(dāng)圖像緩緩呈現(xiàn),你期待的那條帶,要么缺席,要么虛弱得像一道影子,在Ma...
那天下午,武漢的雨下得很大。 我在辦公室接到一個(gè)電話,對(duì)方是某高校的博士生,說話帶著明顯的鼻音,像是感冒了,又像是剛哭過。她說她的Western Blot做了三個(gè)月,同一個(gè)蛋...
說起來你可能也有同感:WB實(shí)驗(yàn)做到最后,讓人緊張的往往不是條帶有或者沒有,而是——這條帶到底真不真? 上周幫師弟看結(jié)果,他的p-AKT條帶亮得晃眼,但內(nèi)參卻歪歪扭扭。小伙子還...
第一次跑出完美的Western Blot,是什么感覺? 或許你也有過這樣的瞬間。顯影儀緩緩?fù)鲁鰣D像,你湊近屏幕,屏住呼吸——然后愣了愣。背景干凈得像一張白紙,目標(biāo)條帶端端正正...
WB 跑廢了三十張膜之后,我終于學(xué)會(huì)了跟失敗和解。 那時(shí)候我剛接手一個(gè)新課題,目標(biāo)蛋白冷門到連抗體公司官網(wǎng)都搜不出幾條結(jié)果。好不容易找到一家號(hào)稱能做的,下單、等待、收貨、實(shí)驗(yàn)...
等待,大概是科研這場(chǎng)馬拉松里最磨人的一段路程。 等待樣本處理,等待儀器空閑,等待一個(gè)轉(zhuǎn)染結(jié)果——而最讓人心懸著的,往往是等待那支定制兔抗體從免疫到收獲的全過程。實(shí)驗(yàn)方案已經(jīng)躺...
信號(hào)弱了一截,背景卻濃得化不開。 這種場(chǎng)景太熟悉了——Western blot 曝光出來,目標(biāo)條帶像個(gè)害羞的客人,遲遲不肯現(xiàn)身;旁邊的非特異性條帶卻扎堆亮相,熱鬧得讓人頭疼。...
實(shí)驗(yàn)臺(tái)前的燈光打在膠片上,小林盯著剛顯影出來的結(jié)果,嘆了口氣。 本該是單一清晰的條帶位置,現(xiàn)在卻像一幅抽象畫——目標(biāo)蛋白的位置有一條帶,但它上下左右還陪著七八個(gè)“朋友”,濃淡...
實(shí)驗(yàn)室的窗戶外,夜色已深。小周盯著屏幕上那條若有若無的條帶,第9次重復(fù)的實(shí)驗(yàn),目標(biāo)蛋白的信號(hào)依然微弱得像在跟他捉迷藏。 “抗體親和力不夠。”師兄路過時(shí)掃了一眼,留下一句話就走...