慢乙肝患者接受聚乙二醇干擾素α（PEG IFNα）治療的臨床療效存在顯著個體差異，更好地了解與PEG IFNα療效相關(guān)的病毒學(xué)及宿主因素可能有助于提高療效，實(shí)現(xiàn)更好的個體化治療。近期已有多項研究報道三基序蛋白（TRIM）家族成員如TRIM22、TRIM26 rs116806878可作為預(yù)測PEG IFNα治療應(yīng)答的潛在生物標(biāo)志物（二）。
重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院的秦波教授團(tuán)隊既往已發(fā)表研究證實(shí)IFNα可誘導(dǎo)TRIM38的表達(dá)，TRIM38高表達(dá)可抑制HBV的復(fù)制及基因表達(dá)，并增強(qiáng)IFNα的抗病毒作用，治療過程中較高的TRIM38水平是預(yù)測PEG IFNα治療應(yīng)答的有效生物標(biāo)志物。近期，該團(tuán)隊再次發(fā)表研究表明，在PEG IFNα治療HBeAg陰性慢性HBV感染者時，早期更高的TRIM19及TRIM38水平均與較好的治療應(yīng)答以及更好的HBsAg清除率有關(guān)，治療24周時 TRIM19與TRIM38 mRNA的變化值可較好預(yù)測其對PEG IFNα的治療應(yīng)答。
研究方法：
01、入組人群
該前瞻性觀察隊列研究納入43例于2021年1月至2022年1月期間在重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院接受PEG IFNα治療的HBeAg陰性慢性HBV感染者。患者年齡為18 - 65歲，診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)AASLD2018指南：HBsAg陽性，HBeAg陰性，HBeAb陽性，HBcAb陽性，HBV DNA < 2000 IU/mL，肝功能正常，無或輕度肝組織炎癥/肝纖維化。此外，研究還納入32例初治慢乙肝（CHB）患者及19例健康對照者（HCs）。
02、HBeAg陰性慢性HBV感染者經(jīng)PEG IFNα治療后的分組
應(yīng)答組（R組）為PEG IFNα治療48周后，HBV DNA下降> 2 log10 IU/mL或HBsAg迅速下降（HBsAg下降> 1 log10 IU/mL或HBsAg清除）的患者；其余患者歸為無應(yīng)答組（NR組）。
血清學(xué)應(yīng)答組（SR組）為在PEG IFNα治療期間獲得HBsAg清除或HBsAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換的患者；其余患者歸為無血清學(xué)應(yīng)答組（NSR組）。
03、檢測指標(biāo)
HBeAg陰性慢性HBV感染者接受PEG IFNα治療48周，在基線和此后每12周檢測HBsAg、HBV DNA、肝功能和血常規(guī)。在基線、12周和24周后采集外周血樣本，分離PBMCs并檢測TRIM19和TRIM38 mRNA水平。初治CHB患者和健康對照者僅在基線時接受檢測。
研究結(jié)果
一. PEG IFNα治療HBeAg陰性慢性HBV感染者48周的HBsAg清除率為25.58%
HBeAg陰性慢性HBV感染者經(jīng)PEG IFNα治療48周時HBsAg清除率為25.58%?；€時，健康對照（HCs）組、初治CHB患者組和PEG IFNα治療的HBeAg陰性慢性HBV感染者組間的性別、年齡、ALT、AST及白細(xì)胞計數(shù)（WBC）無顯著性差異（P 均 > 0.05）。
各組患者的基線特征
43例HBeAg陰性慢性HBV感染者接受PEG IFNα治療48周，1例在PEG IFNα治療12周時獲得HBsAg清除，24周、36周和48周時HBsAg清除率分別為9.30%、11.63%和25.58%。24周、36周和48周的HBsAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換率分別為6.98%、9.30%和13.95%。
PEG IFNα治療期間HBeAg陰性慢性HBV感染者的HBsAg清除率及血清學(xué)轉(zhuǎn)換率
二. 各人群基線時TRIM19/38 mRNA水平及其與病毒學(xué)指標(biāo)的關(guān)系
01、初治慢乙肝患者的TRIM19/38 mRNA水平顯著低于健康對照者
比較基線時健康對照組和初治CHB組PBMCs中的TRIM19/38 mRNA水平，結(jié)果顯示初治CHB組PBMCs中TRIM19（P = 0.0429）和TRIM38（P = 0.0120）mRNA水平顯著低于健康對照組（圖A,B）。
基線時初治CHB患者與健康對照者PBMCs中
TRIM19 mRNA（A）和TRIM38 mRNA（B）水平比較
02、HBeAg陰性慢性HBV感染者基線時的TRIM19/38 mRNA水平與HBV DNA及ALT水平呈負(fù)相關(guān)
分析基線時HBeAg陰性慢性HBV感染者的PBMCs中TRIM19/38 mRNA水平與HBV病毒學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果顯示TRIM19和TRIM38 mRNA水平與HBsAg水平無顯著相關(guān)（圖A,D）。TRIM19 mRNA水平（r = -0.1216, P = 0.0219）及TRIM38 mRNA水平（r = -0.1591, P = 0.0081）與HBV DNA均呈負(fù)相關(guān)（圖B,E）。TRIM19 mRNA水平（r = -0.2379, P = 0.0009）及TRIM38 mRNA水平（r = -0.1758, P = 0.0051）與ALT均呈負(fù)相關(guān)（圖C,F）。
基線時IHCs的TRIM19/38 mRNA水平與HBsAg（A,D）、
HBV DNA（B,E）和ALT（C,F）的相關(guān)性分析
三. HBeAg陰性慢性HBV感染者的TRIM19/38 mRNA水平與PEG IFNα的治療應(yīng)答及臨床治愈的關(guān)系
01、PEG IFNα治療早期較高的TRIM19/38 mRNA水平與治療應(yīng)答更佳相關(guān)
根據(jù)PEG IFNα治療第48周時HBV DNA和HBsAg水平的變化將HBeAg陰性慢性HBV感染者分為應(yīng)答組（R組，n = 16）和無應(yīng)答組（NR組，n = 27）?；€時，兩組的血清HBsAg水平相似，但R組的HBV DNA水平顯著低于NR組（P = 0.0022），R組的ALT水平顯著高于NR組（P = 0.0025）。治療12周和24周時R組的HBsAg水平（P = 0.0004, 12w；P < 0.0001, 24w）顯著低于NR組，ALT水平（P = 0.0019, 12w）和AST水平（P = 0.0001, 12w）顯著高于NR組。
HBeAg陰性慢性HBV感染者中應(yīng)答組（R組）
與無應(yīng)答組（NR組）的臨床特征比較
相較于基線，治療24周時R組的TRIM19 mRNA水平顯著更高（P = 0.0203），12周和24周時R組的TRIM38 mRNA水平均顯著更高（P = 0.0042; P = 0.0002）（圖A,B）。
HBeAg陰性慢性HBV感染者中R組治療期間
TRIM19 mRNA（A）和TRIM38 mRNA（B）水平的動態(tài)變化相較于基線，NR組治療12周和24周時TRIM19/38 mRNA水平無明顯升高（圖C,D）。
HBeAg陰性慢性HBV感染者中NR組治療期間
TRIM19 mRNA（C）和TRIM38 mRNA（D）
水平的動態(tài)變化比較治療期間R組和NR組的TRIM19 mRNA和TRIM38 mRNA水平發(fā)現(xiàn)，治療24周時R組的TRIM19 mRNA水平顯著高于NR組（P = 0.0061）。R組的TRIM38 mRNA水平在12周和24周時均顯著高于NR組（P = 0.0081; P = 0.0001）（圖E,F）。
比較HBeAg陰性慢性HBV感染者中R組和NR組治療前、
治療12周和治療24周時TRIM19 mRNA（E）
和TRIM38 mRNA（F）水平比較提示在PEG IFNα治療早期，R組的TRIM19/38 mRNA水平高于NR組，較高的TRIM19/38 mRNA水平可能與PEG IFNα治療應(yīng)答更佳相關(guān)。
02、PEG IFNα治療24周時TRIM19/38 mRNA水平更高可能與更高的HBsAg清除率或血清學(xué)轉(zhuǎn)換率相關(guān)
根據(jù)是否獲得HBsAg清除或血清學(xué)轉(zhuǎn)換將PEG IFNα治療的HBeAg陰性慢性HBV感染者分為血清學(xué)應(yīng)答組（SR組, n = 11）和無血清學(xué)應(yīng)答組（NSR組, n = 32）?；€時兩組的HBV DNA、ALT和AST水平相似，但SR組的血清HBsAg顯著低于NSR組（P = 0.0006）。PEG IFNα治療后SR組的HBsAg（P < 0.0001, 12w; P < 0.0001, 24w）顯著低于NSR組；SR組的ALT（P = 0.0001, 12w）和AST（P = 0.0001, 12w）水平顯著高于NSR組。
HBeAg陰性慢性HBV感染者中血清學(xué)應(yīng)答組（SR組）與
無血清學(xué)應(yīng)答組（NSR組）的臨床特征比較
治療12周時，SR組和NSR組的TRIM19/38 mRNA水平均有所升高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。治療24周時，SR組的TRIM19（P = 0.0296）和TRIM38（P = 0.0041）mRNA水平均顯著高于NSR組（圖A,B）。提示較高的TRIM19/38 mRNA水平可能與PEG IFNα治療早期更高的HBsAg清除率或血清學(xué)轉(zhuǎn)換率有關(guān)。
HBeAg陰性慢性HBV感染者中SR組和NSR組治療前、
治療12周和24周時TRIM19 mRNA（A）
和TRIM38 mRNA（B）水平比較
03、從基線至治療24周時的TRIM19/38 mRNA變化值可較好預(yù)測HBeAg陰性慢性HBV感染者對PEG IFNα的治療應(yīng)答
進(jìn)一步評估HBeAg陰性慢性HBV感染者的TRIM19/38 mRNA水平與PEG IFNα治療應(yīng)答之間的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，R組從基線至治療24周時的TRIM19 mRNA水平變化值（FC-TRIM19wk24/wk0）顯著高于NR組（P = 0.0139, 圖A）；R組從基線至治療24周時的TRIM38 mRNA水平變化值（FC-TRIM38wk24/wk0）也顯著高于NR組（P = 0.0352, 圖B）。
基線至治療24周，R組和NR組PBMCs中
TRIM19 mRNA（A）和TRIM38 mRNA（B）水平的變化
受試者工作特征（ROC）曲線分析顯示，FC-TRIM19/38wk24/wk0均能較好預(yù)測HBeAg陰性慢性HBV感染者對PEG IFNα的治療應(yīng)答。FC-TRIM19wk24/wk0的AUC為0.694 (P = 0.0348，圖C)，最佳臨界值為1.263，靈敏度為48.15%，特異性為87.50%。FC-TRIM38wk24/wk0的AUC為0.757（P = 0.0053，圖D），最佳臨界值為1.381，靈敏度和特異性分別為70.37%和87.50%。
FC-TRIM19/38wk24/wk0預(yù)測HBeAg陰性慢性HBV感染者
對PEG IFNα治療應(yīng)答的ROC曲線圖
肝霖君有話說
本研究的人群為AASLD指南定義的HBeAg陰性慢性HBV感染者，對HBsAg水平無閾值要求，因此其HBsAg清除率與我國指南定義的非活動性HBsAg攜帶人群（IHCs）有差異。研究發(fā)現(xiàn)這類人群基線時TRIM19/38 mRNA水平與HBV DNA和ALT呈負(fù)相關(guān)?？赡苁怯捎赥RIM19/TRIM38被HBV抑制進(jìn)而導(dǎo)致TRIM19/38 mRNA水平下降，證明TRIM19/38可能與HBV感染有關(guān)。
進(jìn)一步研究顯示，PEG IFNα早期治療應(yīng)答組的TRIM19/38 mRNA水平顯著高于未應(yīng)答組，治療24周時血清學(xué)應(yīng)答組的TRIM19/38 mRNA水平顯著高于無血清學(xué)應(yīng)答組；且基線至治療24周時TRIM19/38 mRNA水平的變化值均可較好預(yù)測其對PEG IFNα的治療應(yīng)答。既往有研究探索證實(shí)HBcrAg、HBsAg的組成（大表面蛋白和中表面蛋白）及基線血清免疫球蛋白G（IgG）等也可以預(yù)測PEG IFNα治療IHCs人群的HBsAg清除（相關(guān)鏈接一、三）。隨著抗病毒治療適應(yīng)證的不斷拓展以及各類人群臨床治愈證據(jù)的不斷累積，探索更多有利于臨床實(shí)踐的預(yù)測指標(biāo)非常有價值。
參考文獻(xiàn)：
Luo H, Tan G, Hu X, et al. Triple motif proteins 19 and 38 correlated with treatment responses and HBsAg clearance in HBeAg-negative chronic hepatitis B patients during peg-IFN-α therapy[J]. Virol J. 2023; 20(1): 161.
