A covalent PIN1 inhibitor selectively targets cancer cells by a dual mechanism of action
Nat. Commun.?8,?15772 doi: 10.1038/ncomms15772 (2017)
關(guān)鍵字：藥篩，流式細(xì)胞儀，Celesta，活性氧
概述：脯氨酰異構(gòu)酶 （PIN1）是多種信號(hào)通路的關(guān)鍵修飾因子，在大多數(shù)癌癥中都有過(guò)表達(dá)，并且是多種癌癥通路的調(diào)節(jié)器（如：c-MYC, NOTCH1, WNT/b-catenin and RAS/MEK/ERK pathways）其活性對(duì)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展有重要作用。PIN1功能的失活會(huì)抑制腫瘤生長(zhǎng)和癌癥干細(xì)胞的擴(kuò)展，恢復(fù)癌癥化療敏感性并阻止轉(zhuǎn)移擴(kuò)散，以上原因?yàn)榛谝种芇IN1活性的治療策略提供了理論基礎(chǔ)。但是目前仍然缺少有效的PIN1抑制劑作為抗癌藥物。文章中經(jīng)過(guò)藥物篩選，發(fā)現(xiàn)了一種新的共價(jià)PIN1抑制劑-KPT-6566，能夠選擇性地抑制PIN1并將其作為降解的靶點(diǎn)。文中表明了KPT-6566的作用機(jī)制為共價(jià)結(jié)合到PIN1的催化位點(diǎn)，導(dǎo)致一種類(lèi)似醌的藥物的釋放，產(chǎn)生活性氧和DNA損傷，進(jìn)而導(dǎo)致癌細(xì)胞死亡。KPT-6566的體外治療影響了了PIN1依賴(lài)的癌癥表型并且在體內(nèi)治療中降低了肺轉(zhuǎn)移的發(fā)生?，F(xiàn)在就請(qǐng)跟著小編從流式細(xì)胞儀的應(yīng)用的視角淺析下本文吧。
細(xì)胞表型鑒定：CD44/CD24/EpCAM（儀器：FACSCelesta）
細(xì)胞活性氧檢測(cè)： 5 mM終濃度CellROX Green（儀器：FACSCelesta）
凋亡實(shí)驗(yàn)：Annexin V/Propidium Iodide（儀器：Calibur）
流式數(shù)據(jù)分析：FlowJo software
