構(gòu)建載體出現(xiàn)問題，有沒有大佬救救孩子～

請問一下大家，有沒有人碰到這種情況：

構(gòu)建表達(dá)載體時，用的同源重組法，擴出了目的條帶，單酶切了載體，也長了單菌落，PCR驗證了。但是送測序得到的結(jié)果是目的+T載。我不知道是哪里出了問題。是沒擴出同源臂嗎？還是載體酶切沒切開？我重做了兩次擴增和酶切結(jié)果都一樣。所以迷茫了

后來聽別人說建議我菌液PCR用載體引物F+目的片段引物R驗證，出現(xiàn)條帶單一明亮且正確，但是用載體的引物測單向卻失敗無信號。 測通結(jié)果依舊是目的片段+T載體 ，請問大家是哪里出了問題呀？

?著作權(quán)歸作者所有,轉(zhuǎn)載或內(nèi)容合作請聯(lián)系作者
【社區(qū)內(nèi)容提示】社區(qū)部分內(nèi)容疑似由AI輔助生成，瀏覽時請結(jié)合常識與多方信息審慎甄別。
平臺聲明：文章內(nèi)容（如有圖片或視頻亦包括在內(nèi)）由作者上傳并發(fā)布，文章內(nèi)容僅代表作者本人觀點，簡書系信息發(fā)布平臺，僅提供信息存儲服務(wù)。

相關(guān)閱讀更多精彩內(nèi)容

友情鏈接更多精彩內(nèi)容