1.小鼠活體成像實(shí)驗(yàn)

a) 把小鼠放入呼吸麻醉機(jī)的誘導(dǎo)箱中麻醉；

b) 待小鼠麻醉后，小鼠經(jīng)腹腔注射方式注射200uL的D-熒光素鉀鹽工作液，靜置2min；

c)把小鼠放進(jìn)活體成像儀觀察倉(cāng)進(jìn)行生物發(fā)光觀察，呼吸麻醉機(jī)面罩維持麻醉；

d)打開(kāi)活體成像儀軟件，編輯文件名稱(chēng)，待相機(jī)溫度降至-60℃以下后才可開(kāi)始拍攝；

e)曝光時(shí)間：若無(wú)曝光條件，可選擇自動(dòng)曝光拍攝一張，確定曝光時(shí)間后，在統(tǒng)一進(jìn)行拍攝；

f)拍攝張數(shù)：活體成像中不同部位的光信號(hào)達(dá)到最強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期（例：腹腔注射D-熒光素鉀鹽后底物先到達(dá)肝臟后擴(kuò)散到全身，因此通?；铙w成像中肝臟最先達(dá)到最強(qiáng)值后緩慢下降，其余部位緩慢上升），因此根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求確定拍攝幀數(shù)

2.小鼠活體成像和離體器官組織成像實(shí)驗(yàn)

a)把小鼠放入呼吸麻醉機(jī)的誘導(dǎo)箱中麻醉；

b) 待小鼠麻醉后，小鼠經(jīng)腹腔注射方式注射150uL的D-熒光素鉀鹽工作液，靜置2min；

c) 把小鼠放進(jìn)活體成像儀觀察倉(cāng)進(jìn)行生物發(fā)光觀察，呼吸麻醉機(jī)面罩維持麻醉；

d)打開(kāi)活體成像儀軟件，編輯文件名稱(chēng)，待相機(jī)溫度降至-60℃以下后才可開(kāi)始拍攝；

e)曝光時(shí)間：若無(wú)曝光條件，可選擇自動(dòng)曝光拍攝一張，確定曝光時(shí)間后，在統(tǒng)一進(jìn)行拍攝；

f) 拍攝張數(shù)：活體成像中不同部位的光信號(hào)達(dá)到最強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期（例：腹腔注射D-熒光素鉀鹽后底物先到達(dá)肝臟后擴(kuò)散到全身，因此通常活體成像中肝臟最先達(dá)到最強(qiáng)值后緩慢下降，其余部位緩慢上升），因此根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求確定拍攝幀數(shù)

g)待完成全部小動(dòng)物活體成像后，頸椎脫臼處死小鼠，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求取出對(duì)應(yīng)的組織器官，滴加D-熒光素鉀鹽工作液到組織器官上，保證工作液覆蓋每個(gè)組織器官，確保成像準(zhǔn)確。將加好工作液的組織器官放入觀察倉(cāng)內(nèi)進(jìn)行生物發(fā)光拍攝.

h) 后續(xù)步驟同上步驟e)和步驟f)

3. 大鼠活體成像實(shí)驗(yàn)

a)?[endif]把大鼠放入呼吸麻醉機(jī)的誘導(dǎo)箱中麻醉；

b)?[endif]待大鼠麻醉后，大鼠經(jīng)腹腔注射方式注射2mL的D-熒光素鉀鹽工作液，靜置2min；

c)?[endif]把大鼠放進(jìn)活體成像儀觀察倉(cāng)進(jìn)行生物發(fā)光觀察，呼吸麻醉機(jī)面罩維持麻醉；

d) 打開(kāi)活體成像儀軟件，編輯文件名稱(chēng)，待相機(jī)溫度降至-60℃以下后才可開(kāi)始拍攝；

e) 曝光時(shí)間：若無(wú)曝光條件，可選擇自動(dòng)曝光拍攝一張，確定曝光時(shí)間后，在統(tǒng)一進(jìn)行拍攝；

f) 拍攝張數(shù)：活體成像中不同部位的光信號(hào)達(dá)到最強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期（例：腹腔注射D-熒光素鉀鹽后底物先到達(dá)肝臟后擴(kuò)散到全身，因此通常活體成像中肝臟最先達(dá)到最強(qiáng)值后緩慢下降，其余部位緩慢上升），因此根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求確定拍攝幀數(shù)。