CRISPR（成簇規(guī)律間隔短回文重復(fù)序列）和?Cas9（CRISPR?相關(guān)系統(tǒng)或?CRISPR?相關(guān)蛋白?9?核酸酶）是在細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)的一種防御機(jī)制，用于抵御外來?DNA。這一系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)已被證明是基因編輯和基因組工程應(yīng)用中靶向和修改遺傳序列的無價之寶。該系統(tǒng)被稱為?CRISPR/Cas9，通過將?RNA?引導(dǎo)的?Cas9?核酸酶和適當(dāng)?shù)囊龑?dǎo)?RNA（gRNA）導(dǎo)入細(xì)胞，實現(xiàn)對目標(biāo)基因組位點的序列特異性切割。此外，緊隨特異性序列之后的原間隔相鄰基序（PAM）序列對于?Cas9?核酸酶的成功結(jié)合是必需的。監(jiān)測?Cas9?編輯蛋白的水平或在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中追蹤?Cas9?編輯蛋白是重要且關(guān)鍵的，因為這可以告知轉(zhuǎn)染效率并優(yōu)化細(xì)胞群體中的編輯過程。已有報道表明，金黃色葡萄球菌?Cas9（SaCas9）介導(dǎo)的基因組編輯已在人類細(xì)胞和擬南芥中實現(xiàn)。由于?SaCas9（1053?個氨基酸）比化膿性鏈球菌?Cas9（SpCas9）（1368?個氨基酸）更小，SaCas9?在遞送和表達(dá)?Cas9?蛋白方面可能具有顯著優(yōu)勢，尤其是在使用病毒載體時。

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目前，WB是測量?SaCas9?蛋白表達(dá)或含量的最突出的檢測技術(shù)。然而，這種傳統(tǒng)方法需要電泳和轉(zhuǎn)膜過程，使得檢測過程不便、耗時且通量低。EpiQuik??CRISPR/SaCas9（金黃色葡萄球菌）檢測試劑盒（比色法）通過采用獨特的方法來測量?SaCas9?蛋白的含量，解決了這些問題。

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艾美捷EpiQuik CRISPR/SaCas9(S. aureus)檢測ELISA試劑盒（比色法）（#P-4062-48）優(yōu)勢與特點：

1、快速高效的操作流程，可在?3?小時內(nèi)完成。

2、創(chuàng)新的比色法高通量檢測，無需電即可定量測量?Cas9?蛋白含量，特別適合篩選?Cas9?轉(zhuǎn)染克隆。

3、高靈敏度和特異性。檢測限低至?0.1 ng/孔，檢測范圍為?0.5-20 ng/孔，適用于全細(xì)胞提取物的指定含量范圍。僅識別?SaCas9（金黃色葡萄球菌）。

4、方便地包含了用于定量?SaCas9?含量的對照。

5、條帶式微孔板格式使檢測既適用于手動操作，也適用于高通量分析。

6、簡單、可靠且一致的檢測條件。

圖：將不同濃度的?SaCas9?蛋白加入到?1 μg?的?K562?細(xì)胞提取物中。使用?EpiQuik??CRISPR/SaCas9（金黃色葡萄球菌）檢測試劑盒（比色法）測量了?SaCas9?蛋白的含量。

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