文獻DOI：10.26355/eurrev_201810_16180
文獻PMID：30402876
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Combined treatment with myo-inositol, alpha-lipoic acid, folic acid and vitamins significantly improves sperm parameters of sub-fertile men: a multi-centric study
肌醇、α-硫辛酸、葉酸和維生素的聯(lián)合治療顯著改善了亞受精男性的精子參數(shù)：一項多中心研究
目的：減少運動和精子數(shù)量及其形態(tài)的變化是男性不育的最相關(guān)原因之一?；钚匝醯漠a(chǎn)生可能影響精子的運動性，形態(tài)和DNA穩(wěn)定性。本研究旨在評估肌肉肌醇，α-硫辛酸、葉酸、甜菜堿和維生素（即Sinopol?）聯(lián)合治療對亞生育男性精液參數(shù)的影響。
患者和方法：我們招募了143名亞健康男性，年齡26-53歲，不吸煙者，沒有任何睪丸病變，內(nèi)分泌/代謝正常，沒有伴隨的藥物消耗。其中，25名患者未達到研究納入標(biāo)準(zhǔn)，主要原因是Sinopol?處方后出現(xiàn)的生殖器疾病史。在滿足納入標(biāo)準(zhǔn)的118名男性中，10名（8.4％）患者在隨訪中失訪，8名（6.8％）患者自發(fā)懷孕。因此，100名患者完成了研究，并且在治療90天之前和之后進行了精液分析。
結(jié)果：治療90天后精液質(zhì)量得到改善，精子總數(shù)（p=0.0009），精子數(shù)量（p=0.0017），進行性運動（p=0.0047），總運動精子數(shù)量增加有統(tǒng)計學(xué)意義（ p= 0.0010），并且具有正常的精子形態(tài)（p<0.0001）。
結(jié)論：我們第一次報道由肌醇，α-硫辛酸、葉酸、甜菜堿和維生素組成的營養(yǎng)產(chǎn)品組合可以改善亞肥育男性的精子參數(shù)。我們知道，需要澄清數(shù)據(jù)研究的臨床相關(guān)性，需要更大的樣本量和更長的持續(xù)時間，以及評估肌醇和α-硫辛酸聯(lián)合治療有效提高自發(fā)獲得妊娠的機會或遵循輔助生殖。
Keywords Related articles:
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全文翻譯：
介紹
不孕癥是一種生殖系統(tǒng)疾病，其定義是在12個月或更長時間的無保護性交后未能達到臨床妊娠1。它影響約10％的育齡夫婦。男性伴侶是大約40％不孕夫婦不育的唯一原因或促成因素2。據(jù)估計，由于睪丸、睪丸前或睪丸后問題，近7％的育齡期男性是低生育力或不育的。精索靜脈曲張、隱睪癥和性腺功能減退癥等疾病是導(dǎo)致男性不育的原因之一3。然而，約25-30％的不孕患者發(fā)現(xiàn)特發(fā)性不孕4。精子參數(shù)低于世界衛(wèi)生組織（WHO）參考值的男性被認(rèn)為患有男性因素不孕5。最重要的參數(shù)是低精子濃度（低精子癥）、精子活力差（弱精子癥）、和精子形態(tài)異常（畸形精子癥）。與不育相關(guān)性較差的其他因素包括精液量和附睪，前列腺和精囊功能的精液標(biāo)記6。
大約30％至80％的男性因子不育癥病例被認(rèn)為是由于氧化應(yīng)激的破壞性影響，當(dāng)活性氧（ROS）克服精液的天然和 -tioxidant防御并導(dǎo)致細(xì)胞受到細(xì)胞損傷7。 ROS包括廣譜分子，如氧自由基（超氧陰離子，羥自由基，高羥基自由基），非自由基物種（次氯酸和過氧化氫），活性氮物種和游離氮自由基（硝酰基離子，氧化亞氮，過氧亞硝酸鹽）。在生理上，在精漿中，自由基和抗氧化物質(zhì)之間的穩(wěn)態(tài)由一個非常復(fù)雜的系統(tǒng)保證，包括超氧化物歧化酶，過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶依賴性活性，與抗氧化劑（維生素C）、生育酚（維生素E）和谷胱甘肽等有顯著濃度的抗氧化劑有關(guān)。一些條件可能會改變這種抗氧化系統(tǒng)，并可能導(dǎo)致精液中ROS的有害積累。這些包括涉及生殖道（精索靜脈曲張，前列腺炎）、感染、自身免疫和慢性疾病，環(huán)境因素（高溫，電磁輻射，殺蟲劑和空氣污染），一些生活方式（吸煙，酗酒，吸毒成癮）和營養(yǎng)的病理狀況錯誤（不平衡的高脂飲食，肥胖，不良飲食）8。
最近，代謝綜合征及其個體癥狀如肥胖、血脂異常、高血壓和胰島素抵抗的葡萄糖代謝受損，與精子生育潛力和DNA完整性的不利影響相關(guān)9。事實上，過去十年的研究表明，在代謝功能障礙和隨后的氧化應(yīng)激發(fā)展中出現(xiàn)的促炎狀態(tài)可能對正常的精子發(fā)生和精子功能產(chǎn)生直接的不利影響10。精子特別容易受到氧化損傷，因為它們的質(zhì)膜含有豐富的多不飽和脂肪酸，并具有低濃度的清除酶11。在生理狀態(tài)下，精子本身產(chǎn)生少量的ROS，這些ROS是獲能和頂體反應(yīng)所必需的12。白細(xì)胞和異常精子過量產(chǎn)生精液中的ROS可能會影響運動性、形態(tài)、線粒體膜、染色質(zhì)濃縮和DNA穩(wěn)定性，從而影響精子功能13。
口服補充抗氧化劑可以通過減少氧化應(yīng)激來提高精子質(zhì)量14，因此近年來膳食補充抗氧化劑已引起很多關(guān)注13,15-17。一種有效的抗氧化劑是α-硫辛酸（ALA），一種含有巰基的天然短鏈脂肪酸18。它在細(xì)胞的水相（細(xì)胞質(zhì)）和脂質(zhì)相（膜）中均有活性。 ALA是丙酮酸的輔酶脫氫酶和α-酮戊二酸脫氫酶線粒體呼吸酶，從而改善線粒體功能19,20。在細(xì)胞和組織內(nèi)部，ALA被還原為二氫硫辛酸（DHLA），其具有比硫辛酸更多的抗氧化性質(zhì)。 DHLA和ALA都具有金屬螯合能力和清除ROS，DHLA能夠再生內(nèi)源性抗氧化劑維生素E、維生素C和谷胱甘肽，并修復(fù)氧化損傷。 α-硫辛酸也是克雷布斯循環(huán)中的主要因子，有助于ATP生物合成，這對于精子活力至關(guān)重要21。動物研究結(jié)果顯示，ALA給藥后，活動精子的百分比顯著增加21-23。到目前為止，人類只進行了一項研究24。雖然在這方面進行了進一步的研究，但是用ALA補充劑治療精神萎縮癥可以改善精液參數(shù)的質(zhì)量。 此外，ALA被證明可有效減輕肥胖受試者的糖尿病多神經(jīng)病變癥狀和體重26。
其他可能的抗氧化劑，即肌醇（MYO），用于全身治療男性不育癥和改善體外受精技術(shù)中使用的精子質(zhì)量。肌醇是一種多元醇，天然存在于九種立體異構(gòu)體中，包括D-手性肌醇和MYO，屬于維生素B復(fù)合物組。在男性生殖器官中，MYO主要由Sertoli細(xì)胞響應(yīng)卵泡刺激素（FSH）產(chǎn)生，并參與包括調(diào)節(jié)精子細(xì)胞的運動性、獲能和頂體反應(yīng)的過程28,32-34。此外，由于MYO的濃度從附睪到不同的導(dǎo)管增加，因此通過產(chǎn)生肌醇三磷酸和鈣通道開放35，該化合物被認(rèn)為對于精子成熟和精子化學(xué)性質(zhì)是重要的。附睪中低濃度的MYO與轉(zhuǎn)基因小鼠的生育能力降低有關(guān)36。 MYO似乎也在精囊液的滲透調(diào)節(jié)中起作用，有助于降低粘度并增加精子活力31。與此相關(guān)，當(dāng)添加到患有少精子畸形癥的患者的精液中時，MYO減少了無定形物質(zhì)的存在27。在功能水平上，MYO直接作用于線粒體，增加膜電位，從而改善精子參數(shù)改變患者的精子活力37。事實上，體外MYO增加了具有高線粒體膜電位（MMP）的精子數(shù)量，并減少了OAT患者中低MMP的那些數(shù)量37。
葉酸對DNA的合成，轉(zhuǎn)移RNA和蛋白質(zhì)很重要，因此被認(rèn)為在精子發(fā)生過程中很重要38。雖然結(jié)果存在爭議39并且沒有葉酸對內(nèi)分泌參數(shù)的影響40（即FSH，睪酮和抑制素B濃度），一些研究人員40,41證明葉酸干預(yù)改善了亞肥沃雄性的精子濃度和運動能力。甜菜堿是一種天然甲胺，可作為甲基供體轉(zhuǎn)化為有害的高半胱氨酸轉(zhuǎn)化為蛋氨酸。一些研究表明，甜菜堿可能在維持男性生育能力方面發(fā)揮重要作用42,43和抗氧化劑特性44,45。
至于B族維生素，維生素B12對精子數(shù)量、精子活力和減少精子DNA損傷的積極作用可能與增加的能量代謝或由于紅細(xì)胞生成的增加導(dǎo)致更高的氧合作用有關(guān)46。在本研究中，我們的目的是首次評估MYO、ALA、葉酸和維生素聯(lián)合治療對不育男性精液參數(shù)的影響。
患者和方法
患者
2016年4月至2017年9月，在羅馬Sandro Pertini醫(yī)院的UOS人類生殖病理生理學(xué)，Ospedale Policlinico San Martino，熱那亞以及生殖和男科病理生理學(xué)系共招募了143名不吸煙的亞健康男性.143名受試者分析了資格：25個不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，因此被排除在研究之外。其余118名受試者參加。 18名受試者沒有完成研究：10名在隨訪中失訪，8名在自發(fā)妊娠中失訪。因此，統(tǒng)計分析中包括總共100名受試者?；颊吣挲g為26-53歲（平均年齡：39.6±5.9歲），根據(jù)WHO 2010標(biāo)準(zhǔn)，有一個或多個精液參數(shù)改變5。具體而言，在基線時，16％的患者呈現(xiàn)少精子癥，43％為弱精子癥，41％為少精子癥和弱精子癥。此外，患者的體重指數(shù)（BMI）在20 kg/m2和25 kg/m2之間，正常的內(nèi)分泌/代謝特征（穩(wěn)態(tài)模型評估（HOMA）指數(shù)38 <2.5; 150 ng/dL<睪酮<800 ng/dL ，0ng/ml <催乳素<20ng/ml，1.5 mIU/mL <FSH <12.4.0mIU / mL，6mIU / mL <LH <30mIU / mL血清值），并且沒有伴隨的藥物消耗?；加袩o精子癥或嚴(yán)重少精子癥（精子數(shù)低于5×106 / ml）或可識別的不育原因（白細(xì)胞精子癥和/或陽性精子培養(yǎng)，附睪 - 睪丸炎，前列腺炎，腹膜外科手術(shù)，隱睪癥，精索靜脈曲張等）的患者被排除在研究之外。
研究設(shè)計
在基線（T0）和90天（T90）治療后進行精液分析，并比較結(jié)果。該研究得到了利古里亞地區(qū)倫理委員會（批準(zhǔn)號416REG2017）的批準(zhǔn)，每位患者都簽署了一份知情同意書。
治療方案
患者的飲食補充有2片/天的Sinopol（Laborest S.r.1，Nerviano，Milan，Italy）。兩片Sinopol?片劑含有ALA（800 mg），MYO（1000 mg），葉酸（400 mg），甜菜堿（100 mg），維生素B2（1.7 mg），B6（1.9 mg）和B12（2.6 mg）。
精子分析
在T0和T90，在性禁欲3天后獲得精液樣品。將它們收集到無菌容器中并在37℃下保持30分鐘以液化。液化后，根據(jù)WHO標(biāo)準(zhǔn)5進行常規(guī)精子分析，評估精子數(shù)量，運動性和形態(tài)。用于運動性評估的精子評分表示為等級a至d，并且進行性運動率被計算為a+b的百分比。
統(tǒng)計分析
數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）。使用MedCalc?軟件（Mariakerke，比利時）進行Mann-Whitney檢驗，以研究治療前后的精液參數(shù)之間的差異。結(jié)果被認(rèn)為是統(tǒng)計學(xué)上顯著的，p <0.05。
結(jié)果
招募了一百四十三名患者，并開始接受Sinopol?治療。其中，25名患者在學(xué)習(xí)期間未達到入選標(biāo)準(zhǔn)，主要原因是生殖器疾病史，如附睪 - 睪丸炎，前列腺炎，隱睪癥，當(dāng)前生殖器炎癥或精索靜脈曲張，在Sinopol?處方后出現(xiàn)。在滿足納入標(biāo)準(zhǔn)的118名男性中，10名（8.4％）患者在隨訪中失訪，8名（6.8％）患者自發(fā)懷孕。共有100名患者完成了整個研究（圖1）。患者年齡為28-52歲（平均年齡：37.7±4.7歲）。在任何參與者中均未觀察到因口服Sinopol?而產(chǎn)生的副作用。表1中列出了基線和研究結(jié)束時100名參與者的精子參數(shù)。數(shù)據(jù)分析顯示，精子數(shù)量的精子濃度（增加百分比= + 41.2％，p = 0.0009）有統(tǒng)計學(xué)意義的顯著增加（百分比增加= + 50％，p = 0.0017）， 進行性運動（百分比增加= + 31.6％，p = 0.0047），總運動精子數(shù)（增加百分比= + 120％，p = 0.0010）和正常精子形態(tài)（增加百分比= + 60％，p <0.0001）治療后尊重基線。我們還記錄了完成該研究的100名患者的生殖隨訪。在Sinopol?停藥后6個月內(nèi)，伴侶懷孕40例（自發(fā)性6例，子宮內(nèi)人工授精4例，ICSI或FIVET治療后30例）。
討論
這項以多中心為基礎(chǔ)的研究首次評估了與肌醇、α-硫辛酸、葉酸、甜菜堿和亞肥沃男性維生素聯(lián)合治療的效果。在共同施用這些膳食補充劑3個月后，觀察到精子參數(shù)的顯著改善。精子活動性的調(diào)節(jié)在很大程度上控制在中間部分：精子鞭毛處理動力的激活，并且主要的中間部分控制過度活躍48。中間部分富含不飽和脂質(zhì)和飽和的蛋白質(zhì)通道，易受自由基攻擊。因此，ALA和MYO的抗氧化特性可以保護這些組分，進而確保它們的結(jié)構(gòu)和功能完整性49。精子活力的速度也高度依賴于其能量供應(yīng)，從而高度依賴于線粒體的外部和內(nèi)部結(jié)構(gòu)完整性50。同時，正常功能精子的非?；钴S的線粒體產(chǎn)生高水平的自由基作為克雷布斯循環(huán)的副產(chǎn)物。因此，添加抗氧化劑可以保護這些細(xì)胞器免受自由基攻擊，并確保ATP21的恒定產(chǎn)量。
ALA被認(rèn)為通過充當(dāng)輔酶來協(xié)助氧化脫羧的代謝，從而增加細(xì)胞色素C濃度并直接提高線粒體的膜電位，同樣MYO確實27,35,51。此外，MYO被認(rèn)為通過激活磷脂酶C在精子趨化性中發(fā)揮作用，導(dǎo)致肌醇三磷酸和鈣通道開放52的產(chǎn)生，并通過精液無定形物質(zhì)的還原。因此，如所觀察到的，ALA和MYO的協(xié)同作用將導(dǎo)致對精子活動性的積極影響。我們還發(fā)現(xiàn)ALA和MYO的施用能夠增加精子數(shù)量。該發(fā)現(xiàn)可歸因于標(biāo)準(zhǔn)化的氧化應(yīng)激，其一方面可調(diào)節(jié)生殖細(xì)胞的增殖，保護免受DNA片段化和膜損傷，另一方面可維持下丘腦 - 睪丸軸的正常功能所必需的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制。總的來說，ALA和MYO對氧化生殖損傷的防御作用可能導(dǎo)致睪丸激素的正常分泌和精子的產(chǎn)生。關(guān)于這個問題，已經(jīng)證明ALA在睪丸中維持性激素結(jié)合球蛋白和脫氫表雄酮硫酸鹽血清濃度，睪丸膽固醇水平，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性和3β-羥基類固醇脫氫酶活性23。
此外，通過口服給藥，MYO已被指出可改善睪丸的激素環(huán)境。具體而言，MYO能夠重新平衡血清促黃體激素，促卵泡激素（FSH）和抑制素B濃度28。由于FSH在控制支持細(xì)胞數(shù)量和功能方面起著關(guān)鍵作用，這對于正常的精子發(fā)生至關(guān)重要，因此MYO可能會增強這些護士細(xì)胞的功能。在從附睪遷移過程中，MYO似乎在精子的成熟過程中發(fā)揮了重要作用。事實上，MYO顯示出濃度梯度，精液中最豐富的是沿著附睪和不同的導(dǎo)管53增加。
此外，Sinopol?中含有的葉酸和維生素B12可能有助于改善治療中止時的精液特征。葉酸可能對精子發(fā)生有益，因為它是從頭合成嘌呤，胸苷酸和蛋氨酸38所必需的。雖然所涉及的基本機制尚未澄清，但結(jié)果存在爭議39，
一些作者證明葉酸改善了精子的數(shù)量和運動40,41。最近的一項綜述通過增加精子數(shù)量和提高精子活力以及減少精子DNA損傷來證明維生素B12對精液質(zhì)量的積極影響54。維生素B12對精液質(zhì)量的有益作用可能是由于生殖器官的功能增加，同型半胱氨酸毒性降低，產(chǎn)生的一氧化氮量減少，精子氧化損傷水平降低，精子產(chǎn)生的能量減少，炎癥引起的減少精液損傷和核因子-κB活化的控制54。這項研究的優(yōu)勢在于它首次表明，與MYO和ALA聯(lián)合使用葉酸和維生素可以改善精子癥患者的精液質(zhì)量。事實上，到目前為止，已經(jīng)證明MYO或ALA24,28,30,55個體給予不育男性的積極影響，目前Sinopol?被標(biāo)記為膳食補充劑，以抵消受影響的女性的營養(yǎng)缺乏。 PCOS（www.laborest.com/en/products/sinopol/sinopol-fast-slow-tablets）。此外，我們不僅報告了這種聯(lián)合治療對男性受試者沒有不良影響，而且我們還證明了MYO和ALA的劑量低于人類受試者可以耐受的劑量56或用于不育男性24,28,30， 56可能是適當(dāng)有效的，可能是由于ALA和MYO之間的協(xié)同作用。
結(jié)論
我們第一次報道了由肌醇、α-硫辛酸、葉酸、甜菜堿和維生素組成的營養(yǎng)產(chǎn)品組合可以改善亞肥育男性的精子參數(shù)。
我們知道，為了澄清數(shù)據(jù)的臨床相關(guān)性，需要更多樣本量和更長持續(xù)時間的調(diào)查，以及評估MYO和ALA共同治療有效性，以提高自發(fā)或輔助生殖后獲得妊娠的機會。
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