細(xì)胞名稱:B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞)

細(xì)胞別稱: B-16; B16melanoma; B16sublineB78; B78

細(xì)胞貨號(hào): SNL-115

生長特性: 貼壁

培養(yǎng)條件:1640+10% FBS+1% P/S

培養(yǎng)環(huán)境: 37℃；5% CO2；飽和濕度

細(xì)胞簡介:B16細(xì)胞是一株來自C57BL/6小鼠皮膚的黑素瘤細(xì)胞，黑色素生成陽性，但大部分細(xì)胞無色素。據(jù)報(bào)道，細(xì)胞在部分培養(yǎng)條件下可能分泌大量黑色素。尚恩生物確認(rèn)細(xì)胞使用DMEM（GIBCO 12800082）培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)過大量黑色素表達(dá)情況，另外無論細(xì)胞是否在體外培養(yǎng)時(shí)產(chǎn)生黑色素，接種至C57BL/6小鼠體內(nèi)后，瘤體均呈黑色。B16可以用于皮膚癌研究，也是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主。

B16細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1.不建議使用高糖DMEM培養(yǎng)有文獻(xiàn)說明用高糖DMEM培養(yǎng)B16細(xì)胞會(huì)促進(jìn)黑色素分泌，尚恩生物確認(rèn)細(xì)胞使用DMEM（GIBCO 12800082）培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)過大量黑色素表達(dá)情況，因此常規(guī)擴(kuò)增培養(yǎng)不建議使用高糖DMEM。需注意，并不是所有品牌的高糖DMEM都可以使該細(xì)胞分泌黑色素，以實(shí)際情況為準(zhǔn)。

2.注意控制細(xì)胞密度密度過高和過低都會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài)。密度過低時(shí)，細(xì)胞生長速度減慢；長滿后長時(shí)間高密度培養(yǎng)可能導(dǎo)致細(xì)胞黑色素分泌或細(xì)胞狀態(tài)變差。建議細(xì)胞生長至80%密度時(shí)立即傳代。

3.細(xì)胞生長較快注意每天觀察細(xì)胞密度和培養(yǎng)基顏色，及時(shí)換液或傳代。應(yīng)注意每天傳代對細(xì)胞不利，通過控制接種密度將傳代頻率保持在2天左右傳一次為宜。

4.培養(yǎng)時(shí)背景中可能有黑點(diǎn)背景中存在少量黑點(diǎn)，為細(xì)胞代謝產(chǎn)物和細(xì)胞碎片，不影響細(xì)胞生長。若碎片較多可以通過PBS潤洗或換液清除。