1. Author
Mizgerd工作重點(diǎn)是肺部免疫學(xué)及其對(duì)急性下呼吸道感染的影響。研究闡明了肺部先天和適應(yīng)性免疫細(xì)胞和信號(hào)的調(diào)節(jié)和功能，以及他們的變化如何導(dǎo)致肺炎。肺防御包括免疫抵抗（消除微生物的能力）和組織彈性（預(yù)防或抵抗感染和炎癥的有害刺激的能力）。這兩種活動(dòng)都是通過(guò)肺內(nèi)不同細(xì)胞類型的協(xié)調(diào)活動(dòng)完成的，包括一些組成性存在的細(xì)胞（包括上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等）以及其他新招募到受感染組織的細(xì)胞（包括中性粒細(xì)胞和額外的髓樣或淋巴細(xì)胞）。這些細(xì)胞之間相互作用可以有效地消滅微生物而不會(huì)損害肺部，從而保持呼吸健康。這些途徑的失調(diào)反而會(huì)促進(jìn)感染（例如肺炎）、損傷（例如急性呼吸窘迫綜合征）和其他肺部疾病。闡明區(qū)分肺部感染抵抗力和易感性的因素將為預(yù)防和治療肺炎提供新的方法。
2. Background
2.1 駐留B細(xì)胞marker
駐留B細(xì)胞的標(biāo)志性marker有：CD69、PD-L2、CD80、CD73。
CD69:是由CD69基因編碼的人跨膜C型凝集素蛋白。它是一種早期激活標(biāo)志物，在造血干細(xì)胞，T細(xì)胞和免疫系統(tǒng)中的許多其他細(xì)胞類型中表達(dá)。它也與T細(xì)胞分化以及淋巴細(xì)胞在淋巴器官中的保留有關(guān)。
PD-L2:程序性細(xì)胞死亡1配體2是一種在人類中由PDCD1LG2基因編碼的蛋白質(zhì)。PDCD1LG2也被指定為CD273。PDCD1LG2是一種免疫檢查點(diǎn)受體配體，在適應(yīng)性免疫應(yīng)答的負(fù)調(diào)節(jié)中起作用。PD-L2是程序性細(xì)胞死亡蛋白1的兩種已知配體之一。
CD80:免疫球蛋白超家族中的I型B7膜蛋白，具有細(xì)胞外免疫球蛋白恒定樣結(jié)構(gòu)域和受體結(jié)合所需的可變樣結(jié)構(gòu)域。它與另一種B7蛋白CD86緊密相關(guān)，并且經(jīng)常協(xié)同作用。CD80和CD86都與共刺激受體CD28，CTLA-4和p75神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白受體相互作用。
CD73: 5'-核苷酸酶，也稱為ecto-5'-核苷酸酶或CD73，是一種在人類中由NT5E基因編碼的酶。CD73通常用于將AMP轉(zhuǎn)化為腺苷。
2.2 可誘導(dǎo)的支氣管相關(guān)淋巴組織(iBALT)
肺呼吸不可避免地會(huì)使肺粘膜表面暴露于潛在的有害刺激物：包括病原體、過(guò)敏原和顆粒物——每一種都可能引發(fā)肺損傷和炎癥。隨著炎癥消退，B 淋巴細(xì)胞和 T 淋巴細(xì)胞通常會(huì)聚集在大支氣管周圍，形成可誘導(dǎo)的支氣管相關(guān)淋巴組織 (iBALT)。IBALT 的形成可以由多種分子途徑啟動(dòng)，這些途徑匯集于表達(dá)趨化因子的基質(zhì)細(xì)胞的活化和分化，這些基質(zhì)細(xì)胞充當(dāng) iBALT 的支架并促進(jìn)白細(xì)胞的募集、保留和組織。與傳統(tǒng)的淋巴器官一樣，iBALT 從血液中募集幼稚淋巴細(xì)胞，將它們暴露于局部抗原（在本例中是來(lái)自呼吸道），并支持它們活化和分化為效應(yīng)細(xì)胞。iBALT 的活性明顯有利于清除呼吸道病原體；然而，尚不清楚它是否會(huì)抑制或加劇對(duì)非感染性病原體的炎癥反應(yīng)。
2.3 肺炎鏈球菌
Streptococcus?pneumoniae肺炎鏈球菌（肺炎球菌）是一種革蘭陽(yáng)性、alpha-溶血、需氧、有夾膜的雙球菌。肺炎球菌感染是導(dǎo)致中耳炎、肺炎、敗血癥、腦膜炎和死亡的主要原因。通過(guò)革蘭染色和培養(yǎng)確診。治療取決于耐藥性，藥物選擇包括beta-內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類和呼吸系統(tǒng)氟喹諾酮類，截短側(cè)耳素，或有時(shí)需要選用萬(wàn)古霉素。
目前根據(jù)肺炎球菌與型特異性抗血清的反應(yīng)，已鑒定出?>?90種不同的肺炎球菌血清型。肺炎球菌多糖莢膜是逃避吞噬作用的關(guān)鍵。血清3型菌株比其他血清型包膜更厚，形成更多的黏液樣菌落，是成年人侵襲性肺炎球菌病的常見原因。最嚴(yán)重的感染由血清型 3、4、6B、9V、14、18C、19F 和 23F 引起，這些血清型包括在最常最初接種的 PCV15 和 PCV20 中肺炎球菌結(jié)合疫苗。這些血清型引起約90%的兒童侵襲性感染，在成人中這一比例約60%。然而，這些血清型變異緩慢，部分原因?yàn)槎鄡r(jià)疫苗的廣泛應(yīng)用。19A血清型具有高度毒力和耐藥性，已成為呼吸道感染和侵襲性疾病的重要原因；它現(xiàn)在被包括在15價(jià)和20價(jià)肺炎球菌結(jié)合疫苗中。更新的15價(jià)和20價(jià)肺炎球菌結(jié)合疫苗中還包括了其他引起感染的血清型。
2.4 高內(nèi)皮微靜脈(HEV)
HEV是一種表達(dá)外周淋巴結(jié)血管地址素(peripheral lymphonode vascular addressin, PNAd)的特殊血管, 幼稚淋巴細(xì)胞和中央記憶淋巴細(xì)胞由此 經(jīng)循環(huán)作用進(jìn)入淋巴器官。HEV可以作為識(shí)別 TLS的特征性標(biāo)志, HEV的數(shù)目與腫瘤浸潤(rùn)淋巴 細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān), 含有HEV的腫瘤高表達(dá)CCL19、 CCL21、CCR6和L-選擇素, 說(shuō)明HEV是募集淋巴細(xì)胞的通道。
3. Methods
小鼠實(shí)驗(yàn)
細(xì)菌感染
流式細(xì)胞術(shù)
細(xì)胞刪除
Elisa
ELISpots
全血RNA-seq
熒光共聚焦顯微鏡
4. Results
鑒于之前有研究報(bào)道：將SPF小鼠至于日常病原環(huán)境后，循環(huán)的血白細(xì)胞在轉(zhuǎn)錄組水平上有著顯著的變化，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)推測(cè)肺炎鏈球菌的感染是否也會(huì)引起相同的變化。使用血清型為19F的肺炎鏈球菌每周兩次免疫小鼠（感染方式為鼻噴）。發(fā)現(xiàn)免疫過(guò)的小鼠可以很好的抵御后續(xù)的SP3感染。對(duì)其全血的轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行測(cè)序，發(fā)現(xiàn)與未免疫的小鼠相比，只有4個(gè)基因的的mRNA的表達(dá)量有著變化——Lpp，Pmaip1，Nt5c，Arfgap2,但是變化都不顯著，所以實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)認(rèn)為Sp19F感染并不會(huì)很大程度的改變循環(huán)細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組。
鑒于之前的結(jié)果，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)認(rèn)為有一些未被探索的細(xì)胞類型起到了保護(hù)作用。同時(shí)刪除CD4+TRM細(xì)胞后任然有良好的保護(hù)作用。值得一提的是實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)觀察到最初感染肺并沒有擴(kuò)散到對(duì)側(cè)肺中，提示循環(huán)抗體的量是不足的?；谝陨系慕Y(jié)果，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)提出了科學(xué)假設(shè)：MBCs可能在感染的小鼠體內(nèi)起著很好的保護(hù)作用。對(duì)兩組小鼠進(jìn)行免疫組化以及H&E染色，發(fā)現(xiàn)沒有iBALT結(jié)構(gòu)。為了定位B細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)對(duì)其進(jìn)行染色（B220和CD4），發(fā)現(xiàn)感染組中出現(xiàn)了B220陽(yáng)性的細(xì)胞群。在傳導(dǎo)氣道附近，呈小細(xì)胞聚集體以及松散分散，且與CD4陽(yáng)性的細(xì)胞關(guān)聯(lián)度較高。此外與未感染組相比，感染組的支氣管血管束內(nèi)出現(xiàn)小的混合白細(xì)胞聚集體。這些細(xì)胞中的大多數(shù)是CD 19+或CD 4+，CD 19+細(xì)胞聚集在連接傳導(dǎo)氣道與肺動(dòng)脈的疏松間質(zhì)組織中，比動(dòng)脈更靠近氣道。因此感染的小鼠肺中B細(xì)胞定位于遠(yuǎn)端支氣管血管束的結(jié)締組織中。之后實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)為了評(píng)估三級(jí)淋巴器官中高內(nèi)皮微靜脈（HEV）在感染組中是否具有特點(diǎn)對(duì)肺切片進(jìn)行了CD34和外周淋巴結(jié)地址素（PNAd）染色。發(fā)現(xiàn)肺切片的血管內(nèi)皮marker CD34明顯，但是沒有PNAd，說(shuō)明肺切片中不存在HEV。
緊接著實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)對(duì)這群特殊的B細(xì)胞進(jìn)行了表型研究。他們首先通過(guò)靜脈注射anti-CD45進(jìn)行染色，以此來(lái)區(qū)分循環(huán)和駐留的B細(xì)胞。作者將CD19+CD45-的細(xì)胞群定義為EV B cell。感染組的EVB細(xì)胞主要是IgD-，但I(xiàn)VB細(xì)胞主要以IgD+為主。此外與Na?ve組相比，IgD- EVBcell在感染后的顯著增加。這提示我們?cè)诟腥竞蟾患舜罅康姆莕a?ve-Bcell，可能是記憶細(xì)胞。在Sp19 F感染后12周內(nèi)，肺中IgD-EV B細(xì)胞的數(shù)量保持恒定，6個(gè)月下降。 同時(shí)，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)感染小鼠的EV IgD- B細(xì)胞均有MBC表型——CD 38+。上述結(jié)果提示我們:反復(fù)的肺炎鏈球菌感染會(huì)在沒有三級(jí)淋巴器官的情況下，誘導(dǎo)產(chǎn)生MBC。這些MBC 定位于支氣管血管束，在近支氣管的疏松結(jié)締組織。
后續(xù)實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)感染過(guò)Sp19F的小鼠會(huì)產(chǎn)生異型抗體。實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)推測(cè)這些抗體中有一部分是來(lái)自于感染過(guò)后的LLPCS的。去感染組小鼠的骨髓細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)：在未刺激的情況下，上清中可以檢測(cè)到肺炎鏈球菌特異性的IgG和IgA，說(shuō)明了感染后骨髓中存在特異性的漿細(xì)胞。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)想確定肺中是否存在這樣一群細(xì)胞，便在ELISpot版上培養(yǎng)了未刺激的EV肺細(xì)胞。發(fā)現(xiàn)只有在感染組中存在這樣一群B細(xì)胞。具有CD138+CD38lo表型的EV漿細(xì)胞在感染組小鼠中富集，同時(shí)這群細(xì)胞還表達(dá)Blimp-1 marker。而CD38+CD138-（同時(shí)表達(dá)B220和CD19）的這群細(xì)胞被認(rèn)為是LLPCs的前體細(xì)胞。支氣管肺泡灌洗液（BALF）的ELISA分析顯示，從感染小鼠的未感染部位檢測(cè)到異型抗肺炎球菌抗體?？傊@些研究表明：肺炎球菌感染引起LLPC在骨髓和肺中分泌異型抗肺炎球菌抗體，協(xié)助肺中MBC的積累。
接下來(lái)實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)對(duì)這群未被CD45染色的，可能是駐留B細(xì)胞進(jìn)行分析。發(fā)現(xiàn)這群細(xì)胞的表型為：CD69+與CD11a+。與IVB相比，EVB低表達(dá)歸巢分子CD62L，高表達(dá)糖蛋白CD44。后續(xù)實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步聚焦在肺葉的B細(xì)胞表型上。首先Sp19F主要感染在左肺中，并且感染組的左肺中CD69+，CD11a+的EVB細(xì)胞明顯高于右肺。之前所說(shuō)由于感染導(dǎo)致的IgD-EVB細(xì)胞增加也僅限于左肺，所以肺炎鏈球菌感染引起的免疫學(xué)變化僅限于病灶部位——左肺。綜上所述的所有研究證據(jù)表明：這些B細(xì)胞的表型提為BRM細(xì)胞。
在聯(lián)體共生實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞僅限于原始而非伴侶小鼠意味著駐留。B細(xì)胞表型僅限于同側(cè)葉而非對(duì)側(cè)葉支持了這些細(xì)胞是肺駐留而非肺歸巢的假設(shè)。然而，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)意識(shí)到另一種假設(shè)：這些B細(xì)胞不是常駐的，而是循環(huán)的B細(xì)胞，它們只歸巢于先前感染的組織。緊接著實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)EV肺MBC是否穩(wěn)定地保留在肺隔室中。實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)利用鼠CD20抗體刪除外周循環(huán)的CD20+B細(xì)胞（IV和EV肺B細(xì)胞都表達(dá)CD20）?？?CD20抗體給藥后4天或2周有效地刪除IV B細(xì)胞，但對(duì)EV B細(xì)胞沒有影響。由于抗CD 20結(jié)合但不消耗EV肺B細(xì)胞，我們得出結(jié)論，這些細(xì)胞在整個(gè)2周的檢查時(shí)間內(nèi)不會(huì)重新進(jìn)入循環(huán)。因此，由細(xì)菌性肺炎引起的肺MBC是肺駐留細(xì)胞而不是肺歸巢細(xì)胞。
在證明小鼠在感染后體內(nèi)存在BRM后，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)聚焦在了人。實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)采用樣品為肺癌病人樣本。在人肺中觀察到的CD 4 + T細(xì)胞顯著多于B細(xì)胞。這些肺部的CD 19+細(xì)胞中大多數(shù)為CD 27+，其余細(xì)胞為IgD+。同時(shí)這些MBC與CD4+T細(xì)胞都是CD69+。這些肺部中的大多數(shù)MBC都發(fā)生了類別轉(zhuǎn)換，只有大約17%表達(dá)IgM。CD69+MBC的CD38表型呈陰性，表明它們不是生殖中心或漿細(xì)胞。理論上，CD69除了作為駐留的marker以外活化的B細(xì)胞也表達(dá)，但幾乎所有人樣的CD69+MBC中CD83不表達(dá)，所以CD69很可能是常駐細(xì)胞的標(biāo)志物。
既然在人和鼠中都觀察到了這群BRM的存在，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)就想進(jìn)一步的探究這群細(xì)胞的功能。盡管EVB細(xì)胞群內(nèi)包括初始B細(xì)胞（IgD+IgM+），但I(xiàn)gM+IgD-的數(shù)量大于脾或來(lái)自肺的IV區(qū)室中的部分。此外，在EVB細(xì)胞群存在相當(dāng)比例的類別轉(zhuǎn)換的B細(xì)胞，其中大部分為IgG亞型，少部分為IgA。之前已有報(bào)道說(shuō)PD-L2、CD 73和CD 80可以作為MBC的marker。在感染組的小鼠中如預(yù)期的那樣，富集著大量這樣表型的B細(xì)胞。并且EVB群大于IVB群。更重要的是如果共表達(dá)2種以上上述marker則可能是在激活后分化稱抗體分泌細(xì)胞（ASC）。為了測(cè)試小鼠肺中是否存在這群ASC，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)了天然和感染組的總淋巴B細(xì)胞和EVB。體外培養(yǎng)4天后進(jìn)行ELISpot，發(fā)現(xiàn)感染組的刺激B細(xì)胞檢測(cè)到了更多的斑點(diǎn)。盡管刺激也引起脾細(xì)胞中的ASC分化，但在未處理小鼠和經(jīng)歷過(guò)的小鼠之間脾IgG ASC的數(shù)量沒有顯著差異。并且在感染組的肺來(lái)源體外培養(yǎng)上清中檢測(cè)到了病原特異性的IgM和IgG，而脾臟來(lái)源的感染組與天然組都檢測(cè)到了特異性的IgM和IgG。這些結(jié)果表明，天然小鼠的脾臟含有可被刺激以分泌抗肺炎球菌抗原的抗體的B細(xì)胞，并且在肺暴露于肺炎球菌后，這種B細(xì)胞沒有顯著富集。這些脾B細(xì)胞可能由先天性樣邊緣區(qū)或B 1 B細(xì)胞組成，僅在刺激下培養(yǎng)存活，并能夠產(chǎn)生肺炎球菌結(jié)合抗體。為了炎癥病原感染后肺中是否產(chǎn)生局部分泌的抗體，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)分析了感染組的小鼠的肺部灌洗液（0&96h），發(fā)現(xiàn)感染后恩等感染組小鼠BALF含有更多的病原特異性的IgG/IgA/IgM。這些結(jié)果表明：感染小鼠的肺的BRM細(xì)胞在異型病原感染后，局部分泌交叉抗體。
因?yàn)楦腥具^(guò)后的小鼠可以產(chǎn)生抗體保護(hù)小鼠免受異型病原感染，同時(shí)實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)觀察到B細(xì)胞缺陷的小鼠比正常的小鼠細(xì)菌在載量更高，所以實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)想探究是否B細(xì)胞相關(guān)的免疫機(jī)制起到了保護(hù)作用。盡管與正常的B6小鼠相比，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)構(gòu)建的B細(xì)胞缺陷的小鼠模型產(chǎn)生的TRM也略有減少，但是在Sp3感染以后，感染的μMT仍能擁有與感染B6小鼠一樣多的IL-17A(CD4+T細(xì)胞分泌)。既然實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)的推測(cè)是BRM即抗體起到了保護(hù)作用，那么提出疑問(wèn)：異型抗體是否足以在保護(hù)肺免受肺炎球菌感染。他們用Sp3預(yù)混了Sp19F康復(fù)小鼠以及naive的血漿去感染na?ve的小鼠，發(fā)現(xiàn)用上述方法免疫得到的小鼠血漿比天然小鼠的血漿更具有保護(hù)效應(yīng)，提示我們異型抗體可有助于肺防御肺炎球菌。之前有文獻(xiàn)報(bào)道：脾臟含有B1細(xì)胞和邊緣區(qū)B細(xì)胞，可以產(chǎn)生異型抗體，為了探究這些細(xì)胞是否有助于廣譜的抗肺炎球菌肺防御，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)在Sp3感染前3周切除了脾臟。比較了切除組與對(duì)照組，發(fā)現(xiàn)所有感染的除了IgM組有區(qū)別外，其他沒有顯著區(qū)別。這個(gè)提示我們脾臟中的B細(xì)胞對(duì)于針對(duì)局部肺炎球菌感染的非型別依賴性肺免疫是無(wú)效的。緊接著實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)試圖探究血液和淋巴結(jié)遷移的循環(huán)B細(xì)胞是否是感染小鼠免疫所必須的。使用抗CD20抗體可以有效的刪除循環(huán)B細(xì)胞，同時(shí)最大程度的保留BRM，他們測(cè)試了抗CD20治療是否影響感染組小鼠的肺部免疫。在感染組B6小鼠中，抗CD20治療刪除循環(huán)B細(xì)胞4天后對(duì)Sp3沒有影響，所以排除了循環(huán)B細(xì)胞的影響，進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了BRM的作用。
綜上所述，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)認(rèn)為肺BRM對(duì)細(xì)菌清除具有很大作用，但是沒有選擇性刪除BRM的方法。由于這群細(xì)胞（IgD- EVB）表達(dá)PD-L2+，所以實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)想借助這個(gè)特點(diǎn)定向刪除PD-L2+B細(xì)胞。他們構(gòu)建了CD19-Cre雜交PD-L2-ZsGreen-Td-Tomato-diphtheria toxin的小鼠。在這個(gè)小鼠中，所有的PD-L2+的細(xì)胞都帶有熒光 ，CD19-在Cre+與Cre-小鼠中帶有綠色熒光蛋白，CD19+的細(xì)胞在Cre+小鼠中表達(dá)TdTomato以及DT受體。在感染Sp19F后可以在小鼠體內(nèi)產(chǎn)生PD-L2+（TdTomato+）的EVB細(xì)胞，而對(duì)感染組的Cre+小鼠使用白喉毒素，可以有效的刪除PD-L2+細(xì)胞群。相反在Cre-的小鼠使用白喉毒素，影響不顯著。結(jié)合上面的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，?shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)試圖探究PD-L2+細(xì)胞群在感染小鼠中的作用。他們讓Cre+和Cre-小鼠感染后自愈，之后將白喉毒素遞送所有小鼠中試圖刪除Cre+小鼠中肺PD-L2+BRM細(xì)胞，之后用異型菌株感染小鼠。Cre+的小鼠的發(fā)病率顯著提升。由于CD4+T細(xì)胞以及其分泌的細(xì)胞因子有助于肺部免疫，并且可以被B細(xì)胞提呈的抗原刺激，因此實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)試圖通過(guò)比較再次感染后的24或96小時(shí)后白喉毒素處理的Cre-與Cre+的T細(xì)胞因子水平，反應(yīng)肺部免疫是否需要PD-L2+B細(xì)胞。發(fā)現(xiàn)IL17A與IFN-γ沒有明顯差異，說(shuō)明T細(xì)胞應(yīng)答不需要這群細(xì)胞。同時(shí)白喉毒素處理Cre+與Cre-小鼠在循環(huán)的異型抗體水平?jīng)]有明顯的差異，說(shuō)明PD-L2+肺B細(xì)胞對(duì)循環(huán)抗體池沒有實(shí)質(zhì)性貢獻(xiàn)。由于之前實(shí)驗(yàn)證實(shí)在感染期間IgG的水平是升高的，所以實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)提出假設(shè)：局部肺抗體可能需要PD-L2+肺B細(xì)胞。為了測(cè)試PD-L2+肺B細(xì)胞的耗竭是否導(dǎo)致空氣區(qū)抗體的減少，實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)對(duì)BALF進(jìn)行了抗體檢測(cè)。與Cre-小鼠相比，Cre+小鼠中病原特異性IgG的水平顯著較低。刪除PD-L2+ B細(xì)胞的Cre+小鼠的空腔中IgG未被完全消除，但是小于Cre-中的一般，提示我們：識(shí)別Sp3的大多數(shù)但不是全部氣隙IgG需要PD-L2+B細(xì)胞。除此之外，IgA與IgM的水平在Cre+小鼠中較低，一些殘留的異型抗體可能是由肺漿細(xì)胞產(chǎn)生的。綜上所述，BRM細(xì)胞有助于肺抗菌免疫，可能是通過(guò)重新激活后局部分泌異型抗肺炎球菌IgG。
5. Discussion
作者：Kimberly A. Barker
通訊作者：Joseph P. Mizgerd
單位：Boston University School of Medicine, Boston, Massachusetts, USA.
年份：2021.06.01
期刊：The Journal of Clinical Investigation （JCI）
科學(xué)問(wèn)題 ：肺中BRM是否需要iBALT并且iBLAT是否是肺BRM的特征
結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)的研究表明肺炎鏈球菌感染恢復(fù)的小鼠體內(nèi)存在肺部駐留B細(xì)胞（BRM），可以分泌廣譜的保護(hù)抗體。結(jié)合流感也會(huì)引起肺的BRM，且實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)證明了正常人肺組織富含BRM樣細(xì)胞，所以他們認(rèn)為BRM是肺適應(yīng)性免疫的細(xì)胞庫(kù)。COVID-19 大流行引發(fā)了廣泛的關(guān)注和社會(huì)問(wèn)題，有報(bào)道稱從地方性冠狀病毒感染康復(fù)者的人面對(duì)SARS-CoV-2時(shí)癥狀較輕，提示我們存在著針對(duì)SARS-CoV-2的交叉保護(hù)，這篇文章的結(jié)論——肺BRM發(fā)揮是發(fā)揮交叉保護(hù)的重要細(xì)胞群。除此以外BRM還有很多東西需要研究：BRM的招募與駐留因素；抗體組庫(kù)；以及BRM細(xì)胞是否同TRM一樣，廣泛存在于器官中。
