吳聊大鼠:LBP對衰老型小鼠行為的影響|跳臺實驗

吳聊大鼠,大家好,我是吳文遠。

研究表明,LBP(Lyciumbarbarumpolysaccharide,LBP)發(fā)現(xiàn)LBP對染鉛小鼠和錳中毒小鼠腦功能有改善作用,能提高腦功能損傷小鼠的空間學習和記憶能力。鉛、錳中毒引起的腦損傷是病理性過程,而衰老是隨著年齡的增長,生物體在形態(tài)結構和生理功能方面出現(xiàn)的一系列退行性改變。與病理性損傷不同,衰老所致的腦功能退化是一個自然、生理過程。因此,本文將研究LBP是否對衰老導致的學習認知能力減退有改善作用。

1實驗材料

1.1實驗動物與藥劑、儀器

SPF級昆明小鼠,雌雄各半,體重18~22g。純度80.5%的LBP濃縮提取液。跳臺箱材質采用無味的ABS塑料材質或者醫(yī)用有機板,顏色為黑色或者灰色。上海欣軟信息科技有限公司生產的跳臺箱包括一個30cm*30cm,底部可通電的實驗箱、一個直徑為5cm/10cm 的平臺以及SuperSdt跳臺視頻分析軟件(型號:XR-3TB),通常平臺高度與直徑一樣,尺寸可定制。實驗箱上方安裝錄像監(jiān)控器(視頻盒),以錄制動物在實驗箱中的活動情況,以供日后分析使用。

1.2實驗設計

實驗設計正常對照組、模型組、維生素E組、LBP各組(100、200、300mg/kg)。除正常對照組(由正常小鼠組成)外,其余各組小鼠每天頸部皮下注射D-半乳糖溶液(100mg/kg)建立模型組。造模期間,小鼠灌胃給予維生素E(200mg/kg)組成維生素E組、分別灌胃給予不同劑量的LBP(100、200、300mg/kg)組成LBP各組。8周后執(zhí)行曠場、強迫游泳和跳臺實驗,測試小鼠的運動、空間探索、學習和記憶能力。

2實驗方法

2.1曠場實驗

實驗開始前所有小鼠均提前適應環(huán)境,實驗小鼠每只測試1次。將小鼠放入實驗箱的中心位置,在箱中自由探索環(huán)境5min。記錄5min內小鼠的運動時間、運動速度和后肢直立次數(shù)(包括攀附箱壁和兩支前爪騰空次數(shù))。

曠場實驗儀器 型號XR-XZ301 上海欣軟

2.2強迫游泳實驗

實驗前所有小鼠均提前適應環(huán)境。將實驗小鼠提尾置于實驗箱的中心位置正上方,隨后松手使小鼠自由落體入水,隨即開始讓小鼠在水中游泳。

強迫游泳實驗儀器 型號XR-XQ202 上海欣軟

2.3跳臺實驗

小鼠跳臺四間反應箱規(guī)格為25cm×25cm×30cm,箱底是通36V連續(xù)電刺激的銅柵。每間中間放置一直徑12cm、高4.5cm的橡皮墊,作為小鼠回避電擊的安全區(qū)。小鼠實驗前先適應環(huán)境3min,然后底部銅柵通以36V交流電。記錄小鼠受到電刺激后跳上橡皮墊的反應時間以及5min內的錯誤次數(shù)(受到電擊的次數(shù))。24h后將小鼠再次置于跳臺儀中適應3min,將其置于橡皮墊上,記錄第1次跳上橡皮墊的潛伏期,作為記憶成績。

3實驗結果

3.1曠場實驗

如表1所示,與正常對照組相比,衰老模型組小鼠運動時間、運動速度和后肢直立的次數(shù)均顯著下降(P<0.01)。經不同劑量LBP和維生素E治療后,與模型組小鼠比較,LBP組和維生素E組小鼠運動時間、運動速度和站立次數(shù)均明顯增加(P<0.01,P<0.05),LBP組和維生素E組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),LBP組和與正常對照組相比也無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。

表1 各組小鼠5 min內的曠場試驗結果(xˉ± s ,n=8)

3.2強迫游泳實驗

每只小鼠在5min內的游泳時間如表2所示,模型組與正常對照組小鼠相比,5min內的游泳時間顯著降低(P<0.01)。LBP治療各組及維生素E組與模型組小鼠比較,小鼠的游泳時間均明顯延長(P<0.05,P<0.01),而LBP組與正常對照組相比無顯著性差異(P>0.05)。

表2 各組小鼠5 min內的游泳時間結果(xˉ± s ,n=8)

3.3跳臺實驗

跳臺實驗常用來測試小鼠被動學習記憶能力。2次跳臺實驗結果如表3所示,第1次測試,各組小鼠的上臺潛伏期沒有明顯差異(P>0.05)。但在第2次記憶重現(xiàn)測試中,模型組小鼠的上臺潛伏期明顯比正常組小鼠延長。經LBP治療后,各治療組小鼠的上臺潛伏期均縮短,與模型組小鼠比較有顯著性差異(P<0.05,P<0.01),中劑量和高劑量LBP組與正常對照組相比也無統(tǒng)計學差異(P>0.05)

表3 各組小鼠2次上臺的潛伏期結果(xˉ± s ,n=8)

4討論

本研究結果證實LBP能提高提高衰老小鼠的運動能力、空間 探索、學習和記憶能力,使衰老小鼠活力增加。

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