吳聊大鼠。大家好，我是上海欣軟的吳文遠(yuǎn)。
許多研究發(fā)現(xiàn)，適當(dāng)?shù)臒釕?yīng)激可以增強機體對外界有害應(yīng)激的反應(yīng)，如提高機體對高溫和缺血的耐受能力。目前對熱應(yīng)激預(yù)處理的研究多集中于對各種應(yīng)激反應(yīng)的保護，而對熱應(yīng)激預(yù)處理本身對機體尤其是腦和機體功能影響的研究較少，也沒有不同熱應(yīng)激預(yù)處理方法對腦和機體功能影響的對比研究。本實驗通過免疫組織化學(xué)和動物行為學(xué)的方法，初步探索了不同熱應(yīng)激預(yù)處理對小鼠學(xué)習(xí)記憶和身體狀況的影響，為選擇合理的熱應(yīng)激預(yù)處理方法提供了科學(xué)依據(jù)。
1對象和方法
1.1實驗動物及分組
成年健康昆明系雄性小鼠共120只,體質(zhì)量(20.0±3.5)g,隨機分為4組:正常對照組(NC)、熱應(yīng)激組(HS)、間歇性預(yù)處理組(PHP)、連續(xù)性預(yù)處理組(CHP),每組30只,在熱應(yīng)激后6、12、24h3個時間點每組均取10只進行實驗。對照組不施與熱處理,在相同時間點進行同步實驗。
1.2小鼠熱應(yīng)激預(yù)處理模型的制備
將PHP、CHP組小鼠在熱應(yīng)激前24h,置于帶鼓風(fēng)裝置的烤箱內(nèi)(42℃),其內(nèi)保持適當(dāng)?shù)臐穸?在烤箱內(nèi)給予熱應(yīng)激預(yù)處理。CHP組在烤箱內(nèi)連續(xù)應(yīng)激45min后取。PHP組在烤箱內(nèi)應(yīng)激20min后,到常溫環(huán)境下恢復(fù)10min,再放入烤箱內(nèi),反復(fù)3次。
1.3小鼠熱應(yīng)激模型的制備
在實驗當(dāng)天,將HS、PHP、CHP組小鼠置于帶鼓風(fēng)裝置的烤箱內(nèi)(42℃),其內(nèi)保持適當(dāng)?shù)臐穸?給予熱應(yīng)激處理,在烤箱內(nèi)連續(xù)應(yīng)激120min后取出。
1.4小鼠穿梭實驗
熱應(yīng)激結(jié)束后6、12、24h分別將小鼠置于CS-2型小白鼠穿梭箱(張家港市生物醫(yī)學(xué)儀器廠)中,使其適應(yīng)環(huán)境5min,以消除其探究反射,然后給以刺激,記錄5min內(nèi)小鼠第1次進入暗室受到電擊所需的時間為逃避潛伏期(Escape latency,EL)和累積錯誤次數(shù)(mistake,M),作為學(xué)習(xí)記憶成績。
1.5數(shù)據(jù)處理
穿梭實驗、nNOS染色結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,實驗數(shù)據(jù)采用SPSS11.5軟件包進行單因素方差分析。
2結(jié)果
2.1不同處理組各時間點穿梭實驗結(jié)果比較
與對照組相比,HS組在6h、12h時錯誤次數(shù)明顯增多,潛伏期明顯縮短(P<0.05);與對照組比較PHP、CHP組在6h時錯誤次數(shù)明顯增高,潛伏期明顯縮短(P<0.05)。與HS組比較,2種預(yù)處理組在6h、12h2個時間點錯誤次數(shù)明顯減少,潛伏期明顯延長(P<0.05),見表1、2。
3討論
近年實驗結(jié)果表明,熱應(yīng)激預(yù)處理對于缺血損傷以及高溫腦損傷有防護作用,但有關(guān)不同HP模型對熱應(yīng)激后動物行為學(xué)的影響還鮮有報道。本研究小鼠穿梭實驗結(jié)果提示,熱應(yīng)激后12h內(nèi)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力明顯下降,在24h后已完全恢復(fù)至正常水平。PHP及CHP組在12h時學(xué)習(xí)記憶能力明顯高于HS組,且與對照組小鼠學(xué)習(xí)記憶能力相當(dāng),表明熱應(yīng)激預(yù)處理對于熱應(yīng)激后出現(xiàn)的學(xué)習(xí)記憶能力下降有較好的改善作用。本研究還發(fā)現(xiàn),在接受相同程度的熱應(yīng)激后,HS組和預(yù)處理組小鼠在6h時學(xué)習(xí)記憶能力均明顯下降,但2種預(yù)處理組小鼠其學(xué)習(xí)記憶能力在12h時已恢復(fù)至正常水平,而HS組小鼠學(xué)習(xí)記憶能力一直到24h時才恢復(fù)。可見,2種熱應(yīng)激預(yù)處理方式對熱應(yīng)激腦損傷都起到了明顯的減輕作用。
