PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride),是蛋白質(zhì)印跡中常用的一種固相支持物。PVDF膜是疏水性的,膜孔徑有大有小,隨著膜孔徑的不斷減小,膜對(duì)低分子量的蛋白結(jié)合就越牢固。大于20kDa的蛋白一般選用0.45um的膜,小于20kDa的蛋白則一般用0.22um的膜。PVDF膜在使用時(shí)需預(yù)處理,用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團(tuán),使其更容易與帶負(fù)電的蛋白結(jié)合。PVDF膜具有較高的機(jī)械強(qiáng)度,是蛋白分離與免疫檢測(cè)的理想載體。
近期,我們實(shí)驗(yàn)室購(gòu)入了兩款PVDF膜,同等電轉(zhuǎn)條件下,我們進(jìn)行了實(shí)驗(yàn),轉(zhuǎn)膜結(jié)果顯示,兩款PVDF膜都可將蛋白marker的各條帶轉(zhuǎn)到膜上,百代生物的PVDF膜上的條帶似乎更為清晰一些,同時(shí),我們也觀察了膜后濾紙的情況,發(fā)現(xiàn)部分蛋白分子已經(jīng)透過(guò)某廠家的PVDF膜轉(zhuǎn)移到濾紙上,而百代的PVDF膜則能更好的結(jié)合蛋白分子,使其保留在膜上。之前也用過(guò)其他廠家的PVDF膜,膜后濾紙上出現(xiàn)蛋白條帶的情況也很常見(jiàn),沒(méi)想到百代的PVDF膜蛋白結(jié)合性能出乎意料,相比于一般的PVDF膜,確實(shí)要更好些。當(dāng)然,它的機(jī)械強(qiáng)度與堅(jiān)韌度也是比較高的、耐熱穩(wěn)定性也不錯(cuò)。如果經(jīng)常做WB實(shí)驗(yàn)的研究者,可以嘗試一下。

圖1. 兩款PVDF膜轉(zhuǎn)膜效果比較。