產(chǎn)品概述
兔抗HCF1抗體親和純化是一款由艾美捷Bethyl Laboratories推出的針對人源HCF1(宿主細胞因子C1)的高親和力兔多克隆抗體(貨號:A301-400A)。該抗體經(jīng)抗原親和層析純化,以完整IgG形式提供,濃度為200 μg/ml,適用于免疫沉淀(IP)和免疫印跡(WB)實驗。
技術參數(shù)詳解
基本特性
靶點蛋白:HCF1(宿主細胞因子1)
反應種屬:人
宿主來源:兔
克隆類型:多克隆
抗體形式:全分子IgG
亞型:IgG
標記:非偶聯(lián)(未?conjugated)
免疫原信息
該抗體識別的表位位于人HCF1蛋白第1985位氨基酸殘基與C末端之間的區(qū)域,具體對應NP_005325.2(GeneID 3054)編號系統(tǒng)中的第1985-2035位殘基區(qū)間。免疫原為固相載體上固定化的HCF1特異性表位。
純化與濃度
純化方式:抗原親和純化
濃度測定:采用比爾定律,1 mg/ml IgG在280 nm波長下的吸光度為1.4
純度:抗原親和純化級
儲存與穩(wěn)定性
參數(shù)?| 條件
儲存溫度?| 2 8 °C
有效期?| 收貨之日起1年
緩沖液?| Tris緩沖鹽水,含0.1% BSA和0.09%疊氮化鈉
注意:疊氮化鈉作為防腐劑,在后續(xù)實驗中如需對細胞進行培養(yǎng)或動物注射,請務必通過透析或超濾去除。
應用與方法參數(shù)
推薦工作濃度
應用?| 推薦用量/稀釋度
免疫沉淀(IP) | 6 μg/mg 裂解液
免疫印跡(WB) | 1:2000 1:10000
免疫印跡(WB)操作要點
1. 封閉與稀釋液:5% 脫脂牛奶-TBST
2. 一抗孵育:過夜孵育
3. 細胞裂解液WB檢測:使用山羊抗兔IgG重輕鏈抗體(A120-101P)
4. 免疫沉淀物WB檢測:使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯(lián)抗體,封閉緩沖液中需添加5%正常豬血清(貨號S100-020)
免疫沉淀(IP)注意事項
該抗體在IP實驗中使用時,后續(xù)WB檢測建議使用抗兔IgG輕鏈特異性二抗,以避免與IP抗體的重鏈產(chǎn)生交叉反應。
靶點生物學功能
HCF1最初被發(fā)現(xiàn)是單純皰疹病毒(HSV)利用的宿主細胞因子,參與病毒轉錄的啟動。在正常細胞中,HCF1作為轉錄共調節(jié)因子,主要涉及以下生物學過程:
組蛋白修飾:參與染色質表觀遺傳調控
細胞周期進程:調控細胞周期相關基因表達
轉錄共激活/抑制:與多種轉錄因子協(xié)同作用
別名
C1 factor, CFF, HCF, HCF1, HCF-1, HFC1, MRX3, PPP1R89(蛋白磷酸酶1調節(jié)亞基89), VCAF, VP16 accessory protein(VP16輔助蛋白)
質量保證
該抗體采用表位特異性親和純化工藝,針對HCF1蛋白C端附近(1985-2035位殘基)的獨特表位進行富集,確保了高特異性和低交叉反應性。每批次產(chǎn)品均經(jīng)過嚴格的質控檢測,符合實驗室研究用標準。
應用范圍建議
1. 蛋白-蛋白相互作用研究:利用IP技術分析HCF1與VP16或其他轉錄因子的復合物形成
2. 細胞周期調控研究:檢測不同細胞周期階段HCF1的表達水平變化
3. 表觀遺傳學分析:結合染色質免疫沉淀(ChIP)技術研究HCF1對組蛋白修飾的影響
4. 病毒感染機制研究:分析HSV感染過程中HCF1的招募與功能
*本產(chǎn)品僅供研究使用,不用于診斷程序。