體外培養(yǎng)細胞的能量代謝
體外培養(yǎng)細胞的主要能量來自葡萄糖。大多數培養(yǎng)液含1 g/L (5.55mmol/L)葡萄糖, 近年來含4.5g/L
葡萄糖的高糖培養(yǎng)液(主要是DMEM 和RPMil640 )
使用得越來越多。這使得細胞增殖更快。葡萄糖主要被細胞用作糖酵解的碳源,以乳酸為終產物。培養(yǎng)細胞中三狻酸循環(huán)(也稱擰檬酸循環(huán))仍然活躍,氨基酸作為碳源,特別是谷氨酰胺(
Gin )
,通過酶氧化成谷氨酸,通過轉氨作用形成酮戊二酸進入三羧酸循環(huán)。因此,有些細胞對培養(yǎng)液中的谷氨酰胺很敏感。由于谷氨酰胺不穩(wěn)定,在長時間保存的培養(yǎng)液中,
Gin 通過脫氨作用會產生對細胞有毒的氨, 不利于細胞生長,所以常常需補加或現(xiàn)加現(xiàn)用。有公司生產的Glutamax
培養(yǎng)液中谷氨酰胺以二肽形式存在,
在培養(yǎng)液中較穩(wěn)定,可常規(guī)加在大量配制的培養(yǎng)液中。生長緩慢的細胞還可通過補加丙酮酸鈉,提供更多碳源,有助于細胞生長。