qRT-PCR設計引物

2022.11.13熒光定量引物設計教程：

1.將自己的目的基因（cDNA）序列粘貼至https://www.genscript.com/tools/real-time-pcr-taqman-primer-design-tool


選取最大的一條（出現(xiàn)非特異性擴增的概率低，序列長度長匹配到的基因更穩(wěn)）將上游引物及下游引物放入NCBI——Blast

目的：是否為非特異性擴增，尤其是基因家族基因相似度高，出現(xiàn)非特異性擴增的可能性更大，所以放入NCBI——相當于提前做一次電子PCR幫助我們篩選



點擊get primer


反應體系：2x Green real time PCR Mastermix 5微升、F和R各0.5微升、cDNA模板：3微升、ddH2O1微升

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