做個(gè)生物實(shí)驗(yàn)也是夠苦逼的啊，不止結(jié)果要好看光鮮，還要做定量…… 也是醉了。明明 western blot 結(jié)果做的那么漂亮，一眼就看出來差異了，還需要定量？！思量起來，這個(gè)也還算簡單，忍了吧。。。
but… 辛辛苦苦做的免疫組化（或熒光）也需要定量——你當(dāng)搬磚就可以隨便使喚了嗎？花花綠綠，斑斑駁駁，腫么分析 ？
還好，我有這本秘籍，一定要看完哦。
進(jìn)入正題
準(zhǔn)備工作
首先，你需要下載 imageJ，然后下載 IHC-Toolbox 插件，并放入 imageJ 的安裝目錄下的 plugins 文件夾下；
送鏈接：
https://imagej.nih.gov/ij/plugins/ihc-toolbox/index.html
開始分析
***1. ***在菜單欄里選擇文件打開，打開實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)圖片（此處所使用圖片來自互聯(lián)網(wǎng)，大家可用自己的數(shù)據(jù)實(shí)戰(zhàn)）；然后在 plugins 菜單下 → 選擇 IHC Toolbox，打開如下：
***2. ***選中感興趣的區(qū)域（ROI），然后點(diǎn)擊 Training；（這里選擇的區(qū)域一定要有代表性，范圍不可太大，也不能太小）
***3. ***上步完成后會(huì)彈出 Color Chooser 窗口，滑動(dòng)滑塊兒以使感興趣的區(qū)域全部被選中；
***4. ***調(diào)整圖片格式，改成 8 bit 灰度圖片，彩色的好看但是不支持哦；（你也可以改成 16 bit 的哈，忘了修改軟件會(huì)蹦出提示的）
調(diào)整完后，大概就是醬紙。
5.Image → Adjust → Threshold… 打開調(diào)整閾值窗口；
***6. ***滑動(dòng)滑塊兒使紅色覆蓋所選區(qū)域，其實(shí)就是告訴軟件你要分析哪些區(qū)域，有點(diǎn)像 ps 中的魔棒？… 反正趕腳很傻瓜；
***7. ***然后就到了黎明前的最后一哆~ 嗦~ 了，告訴軟件你要分析面積還是灰度值，此處我們以面積為例（一定記得要選中 limited to Threshold 哦，切記！切記?。┎凰{(lán)，分析的是整個(gè)圖的面積，就是整個(gè)圖片的像素長寬之積：1392 x 1040
***8. ***最后一步就是出數(shù)據(jù)來 Analyze → Measure，也可以用快捷鍵 Ctrl + M，然后保存數(shù)據(jù)就好了，是不是既簡單又實(shí)用呢？
第一次寫教程，心里還有點(diǎn)忐忑呢，沒有說清楚的地方希望大家留言交流。你的支持就是我最大的動(dòng)力。
